某一質粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導致相應的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質粒載體用BamHI酶切后,與用BamHI酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連接反應,用得到的混合物直接轉化大腸桿菌,結果大腸桿菌有的未被轉化,有的被轉化。被轉化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質粒載體、含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌?;卮鹣铝袉栴}:
(1)質粒載體作為基因工程的工具,應具備的基本條件有 能自我復制、具有標記基因能自我復制、具有標記基因(答出兩點即可)。
而作為基因表達載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子。
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細胞中,未被轉化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的,其原因是 二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長;并且 含有質粒載體含有質粒載體和 含有插入了目的基因的重組質粒含有插入了目的基因的重組質粒的細胞也是不能區(qū)分的,其原因是 二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長。在上述篩選的基礎上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有 四環(huán)素四環(huán)素的固體培養(yǎng)基。
(3)基因工程中,某些噬菌體經改造后可以作為載體,其DNA復制所需的原料來自于 受體細胞受體細胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】能自我復制、具有標記基因;二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長;含有質粒載體;含有插入了目的基因的重組質粒;二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長;四環(huán)素;受體細胞
【解答】
【點評】
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