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卵巢癌是全球第七大最常見的惡性腫瘤。為探究大蒜素對人卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制。請完善以下實(shí)驗(yàn)思路,預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并進(jìn)行分析與討論。
(實(shí)驗(yàn)可選試劑:150μmol/L的大蒜素、300μmol/L的大蒜素、全培養(yǎng)液)回答下列問題:
(1)完善實(shí)驗(yàn)思路
①將人卵巢癌細(xì)胞置于適宜的培養(yǎng)液中,并在37℃、5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
取對數(shù)生長期的細(xì)胞,用
胰蛋白酶
胰蛋白酶
消化制成單細(xì)胞懸液,
離心
離心
后,棄上清液,用1mL全培養(yǎng)液重新制備懸細(xì)胞。②將懸細(xì)胞分為3組,分組情況如下:A組添加適量的150μmol/L的大蒜素、B組添加等量的300μmol/L的大蒜素、C組添加等量的全培養(yǎng)液作對照。
③分別在4h、8h、12h測定各組細(xì)胞的凋亡率,記錄并分析。
(2)預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果(若實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在相同大蒜素濃度時(shí),隨時(shí)間延長,凋亡比例升高;在相同時(shí)間內(nèi),給藥濃度越大,凋亡率相對越高。請?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)坐標(biāo),以柱形圖形式表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果):

(3)分析與討論:為進(jìn)一步研究大蒜素促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡的機(jī)理,可用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測大蒜素對Bax基因表達(dá)的影響,基本思路為:①取各組細(xì)胞,對其進(jìn)行
破碎
破碎
處理后,提取總RNA;②將總RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,將所獲得的cDNA作為
PCR擴(kuò)增的模板
PCR擴(kuò)增的模板
;③所有DNA經(jīng)相同次數(shù)循環(huán)后測定Bax基因的
濃度
濃度
。

【答案】胰蛋白酶;離心;;破碎;PCR擴(kuò)增的模板;濃度
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/26 8:0:9組卷:3引用:2難度:0.5
相似題
  • 1.如圖表示細(xì)胞凋亡過程,其中酶Ⅰ為核酸內(nèi)切酶,能夠切割核酸形成片段;酶Ⅱ?yàn)橐活惖鞍姿饷福苓x擇性地促進(jìn)某些蛋白質(zhì)的水解,從而造成細(xì)胞凋亡。下列相關(guān)敘述正確的是( ?。?br />

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:1引用:2難度:0.6
  • 2.細(xì)胞是動(dòng)物體生命活動(dòng)的基本單位,下列關(guān)于細(xì)胞的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/9 4:30:3組卷:20引用:1難度:0.7
  • 3.下列不屬于細(xì)胞凋亡現(xiàn)象的是(  )
    ①霜凍導(dǎo)致香蕉植株死亡
    ②蝌蚪發(fā)育成青蛙的過程中尾部消失
    ③極端的物理、化學(xué)因素導(dǎo)致的細(xì)胞死亡
    ④花瓣的自然凋落

    發(fā)布:2024/12/31 3:0:2組卷:11引用:3難度:0.7
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