以我國科學家為主的科研團隊將OSNL(即4個基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫)導入黑羽雞胚成纖維細胞(CEFs),誘導其重編程為誘導多能干細胞(iPS),再誘導iPS分化為誘導原始生殖細胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中,最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代,實驗流程如圖?;卮鹣铝袉栴}。
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(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的,為了獲得單細胞懸液,雞胚組織剪碎后需用 胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。動物細胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加 血清血清等天然成分,以滿足細胞對某些細胞因子的需求。
(2)體外獲取OSNL的方法有 PCR技術PCR技術(答出1種即可)。若要在CEFs中表達外源基因的蛋白,需構建基因表達載體,載體中除含有目的基因和標記基因外,還須有啟動子和 終止子、復制原點、標記基因終止子、復制原點、標記基因等。啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結合的部位,有了它才能驅動目的基因轉錄出mRNA,最終表達出所需要的蛋白質。
(3)iPS細胞和iPGCs細胞的形態(tài)、結構和功能不同的根本原因是 基因的選擇性表達基因的選擇性表達。
(4)該實驗流程中用到的生物技術有 基因工程、動物細胞培養(yǎng)基因工程、動物細胞培養(yǎng)(答出2點即可)。
【答案】胰蛋白酶或膠原蛋白酶;血清;PCR技術;終止子、復制原點、標記基因;RNA聚合酶;基因的選擇性表達;基因工程、動物細胞培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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