近年來,生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用最廣泛、發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈才镌澹ú僮鬟^程如圖),獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,并利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。
(1)圖中過程①-②稱為
構(gòu)建cDNA文庫
構(gòu)建cDNA文庫
。
(2)將含有重組載體pMD19-X的大腸桿菌接種到添加X-ga1的培養(yǎng)基上培養(yǎng),一段時間后,應(yīng)該挑選顏色為白色
白色
的菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。
通過PCR技術(shù)能夠中準(zhǔn)確擴增出目的基因-DGAT1基因的原因是引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合
引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合
。
(3)用限制酶酶切pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因,并與酶切后的載體pBI121連接構(gòu)建重組載體并導(dǎo)入到四尾柵藻。DGAT1基因序列兩端無限制酶酶切位點,由表中信息推測擴增DGAT1基因時所用一對引物的一端分別加上的限制酶識別序列是5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’
5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’
。
限制酶及其識別序列
限制酶 |
識別 |
BamHⅠ |
5′-GGATCC-3′ 3′-CCTAGG-5′ |
HindⅢ |
5′-AAGCTT-3′ 3′-TTCGAA-5′ |
EcoRⅠ |
5′-GAATTC-3′ 3′-CTTAAG-5′ |
XbaⅠ |
5′-TCTAGA-3′ 3′-AGATCT-5′ |
(4)在篩選出成功導(dǎo)入DGAT1基因表達載體的四尾柵藻細胞后,經(jīng)多次組織培養(yǎng)得到的細胞中仍能提取到DGAT1基因,你認為DGAT1基因是否已成功轉(zhuǎn)化?說明你的觀點及理由
不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達
不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達
。
(5)研究人員設(shè)計實驗并得到相關(guān)實驗結(jié)果如表2。
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的地?zé)釓U水各項指標(biāo)測定結(jié)果
各項指標(biāo) |
總氮(mg/L) |
總磷(mg/L) |
氟化物(mg/L) |
廢水培養(yǎng)基 |
23.2 |
4.32 |
4.56 |
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 |
1.9 |
0.45 |
0.84 |
實驗人員設(shè)計該實驗的目的在于
檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力
檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力
。該實驗
不能
不能
(“能”或“不能”)達到實驗?zāi)康?。若能,請說明理由;若不能,請進一步完善實驗設(shè)計。