《本草綱目》記載,“蟬花可治療驚癇,夜啼心悸,功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體,內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇及必需氨基酸等成分。為提高產(chǎn)量,研究人員擬從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進(jìn)行人工培養(yǎng)。請回答問題。
(1)制備培養(yǎng)基:
①該實(shí)驗(yàn)選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基,配方如下:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,KH2PO42g,MgSO40.5g,瓊脂20g,用蒸餾水定容至1000mL,自然pH。該培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為微生物生長提供 碳源、氮源、無機(jī)鹽碳源、氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)成分(至少寫出2種),自然 pH為 酸酸性范圍。
②從培養(yǎng)菌種的角度分析,PDA培養(yǎng)基與牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的主要區(qū)別是 PDA一般用于培養(yǎng)真菌,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)細(xì)菌PDA一般用于培養(yǎng)真菌,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)細(xì)菌。
③為了便于篩選蟬擬青霉菌株,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入青霉素以抑制 細(xì)菌細(xì)菌的生長;按培養(yǎng)基功能劃分,該培養(yǎng)基屬于 選擇選擇培養(yǎng)基。
(2)蟬花真菌的分離、純化:
①取新鮮蟬花,用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精進(jìn)行 消毒消毒,取蟲體胸腔中的少許菌絲切成1mm左右長,接種至PDA培養(yǎng)基,然后置于25℃的 恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3~5d,形成菌落。
②待菌落直徑長至0.2~0.5cm時挑選少量菌絲,采用 平板劃線法/稀釋涂布平板平板劃線法/稀釋涂布平板法接種至 PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行純化,純化2~4次,確定無雜菌后,可采用甘油管藏的方法進(jìn)行 (長期)保存(長期)保存。
(3)發(fā)酵生產(chǎn):檢測蟬花真菌發(fā)酵所用的液體培養(yǎng)基是否徹底滅菌,常用方法是 取少量發(fā)酵所用的液體培養(yǎng)基涂布到牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(或完全培養(yǎng)基)上,適宜溫度下培養(yǎng)一段時間,觀察有無菌落產(chǎn)生/取少量液體培養(yǎng)基不進(jìn)行接種,直接進(jìn)行培養(yǎng)取少量發(fā)酵所用的液體培養(yǎng)基涂布到牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(或完全培養(yǎng)基)上,適宜溫度下培養(yǎng)一段時間,觀察有無菌落產(chǎn)生/取少量液體培養(yǎng)基不進(jìn)行接種,直接進(jìn)行培養(yǎng)。
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)(稀釋涂布平板法).
【答案】碳源、氮源、無機(jī)鹽;酸;PDA一般用于培養(yǎng)真菌,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)細(xì)菌;細(xì)菌;選擇;消毒;恒溫培養(yǎng)箱;平板劃線法/稀釋涂布平板;(長期)保存;取少量發(fā)酵所用的液體培養(yǎng)基涂布到牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(或完全培養(yǎng)基)上,適宜溫度下培養(yǎng)一段時間,觀察有無菌落產(chǎn)生/取少量液體培養(yǎng)基不進(jìn)行接種,直接進(jìn)行培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/7/13 8:0:9組卷:17引用:1難度:0.6
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(1)為獲得單菌落,可采用平板劃線法或
A.細(xì)胞膜 B.核糖體 C.?dāng)M核 D.莢膜
(2)表中培養(yǎng)液pH均為6.0,若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定,則應(yīng)選用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
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g/Lg/L B
25g/L
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g/LC __ __
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g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布:2025/1/2 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.5 -
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