番茄黃化曲葉病毒(TYLCV)是一類單鏈環(huán)狀DNA病毒,能引發(fā)番茄黃化曲葉病。檢測(cè)某番茄幼苗是否感染該病毒,實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行以下操作:
①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果;②從番茄幼苗組織樣本中提取DNA;③采集番茄幼苗葉片組織樣本;④利用PCR擴(kuò)增DNA片段。
完成下列問題:
(1)正確的操作順序是 ③②④①③②④①(用數(shù)字序號(hào)表示)。
(2)操作②在番茄研磨液中加入2mol/L的氯化鈉,作用是 溶解DNA溶解DNA;研磨液中的乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)的作用是 抑制DNA酶活性,防止DNA被酶解抑制DNA酶活性,防止DNA被酶解。
(3)操作④中使用的酶是 耐高溫的DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶。PCR反應(yīng)中每次循環(huán)可分為 變性變性、退火、延伸三步。
(4)PCR擴(kuò)增得到的產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳后的結(jié)果如下:

注:M:DNA marker;1-4:空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照、樣品
實(shí)驗(yàn)中,DNA marker是一組已知長度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段的混合物,起 參照參照作用。健康番茄幼苗的DNA是陰性對(duì)照組,TYLCV的DNATYLCV的DNA是陽性對(duì)照組。若想利用該樣品植株獲得無病毒的番茄幼苗,方法是 取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】③②④①;溶解DNA;抑制DNA酶活性,防止DNA被酶解;耐高溫的DNA聚合酶;變性;參照;TYLCV的DNA;取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:24引用:4難度:0.7
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因,還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物,得到兩個(gè)常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物,突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,得到突變目的基因序列?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
(3)如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7

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