人乳鐵蛋白是一種藥用保健蛋白。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的過程，圖中Tetr表示四環(huán)素抗性基因，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，請回答以下問題：
（1）圖中Tetr和Ampr兩基因是質(zhì)粒中的 標(biāo)記基因標(biāo)記基因，作用是 便于重組DNA分子的篩選便于重組DNA分子的篩選。
（2）構(gòu)建基因表達載體，需要將人乳鐵蛋白基因嵌入到 啟動子和終止子啟動子和終止子之間，才能使乳鐵蛋白基因在牛乳腺細胞中表達。
（3）五種限制酶的識別序列及切割位點如下表所示，要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，若只允許使用一種限制酶，應(yīng)選擇的限制酶是 Sau3AⅠSau3AⅠ。
| 限制酶 | BamHⅠ | HaeⅢ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
| 識別序列及切割位點 | G↓GATCC CCTAG↑G |
GG↓CC CC↑GG |
T↓GATCA ACTAG↑T |
↓GATC CTAG↑ |
GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG |
氨芐青霉素
氨芐青霉素
（填“四環(huán)素”“氨芐青霉素”或“四環(huán)素或氨芐青霉素”）的培養(yǎng)基上進行，原因是 用限制酶切割后破壞了Tetr基因，但不會破壞Ampr基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細胞（對氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來
用限制酶切割后破壞了Tetr基因，但不會破壞Ampr基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細胞（對氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來
。篩選出的重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛受精卵，①過程常用的方法是 顯微注射法
顯微注射法
。（5）培養(yǎng)出早期胚胎后，科學(xué)家欲進行胚胎分割移植，則應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
，將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中，然后用分割針進行分割。檢測轉(zhuǎn)基因牛乳汁中是否含有人乳鐵蛋白，可采用 抗原抗體雜交
抗原抗體雜交
技術(shù)。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】標(biāo)記基因；便于重組DNA分子的篩選；啟動子和終止子；Sau3AⅠ；氨芐青霉素；用限制酶切割后破壞了Tetr基因，但不會破壞Ampr基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細胞（對氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來；顯微注射法；桑葚胚或囊胚；抗原抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/19 8:0:9組卷：23引用：2難度：0.5
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（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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