某生物興趣小組欲從富含纖維素的土壤中篩選纖維素酶活性高的目標菌,并對其進行研究。請回答下列問題:
(1)在目標菌篩選過程中,將土壤樣品稀釋液接種至以
纖維素
纖維素
為主要碳源的固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),除這種主要碳源外,該培養(yǎng)基還含有酵母膏、水、KH2PO4、土豆汁和瓊脂
瓊脂
。
(2)進行微生物菌種純化時,為得到單菌落,最常用的兩種接種方法是平板劃線法
平板劃線法
和稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
。
(3)從土壤中篩選目標菌時,加剛果紅染色后,平板上出現(xiàn)了A、B和C三種菌落(如圖所示)。如果要得到纖維素酶活性最高的菌株,應該選擇B
B
(填“A”“B”或“C”)菌落進一步純化。A菌落經(jīng)檢測其為硝化細菌,據(jù)此說明A菌落能在此培養(yǎng)基上生長且沒有形成透明圈的原因是硝化細菌屬于化能自養(yǎng)微生物,該菌不產生纖維素酶,所以不能利用纖維素作為碳源,但可以將空氣中的CO2作為碳源合成糖類
硝化細菌屬于化能自養(yǎng)微生物,該菌不產生纖維素酶,所以不能利用纖維素作為碳源,但可以將空氣中的CO2作為碳源合成糖類
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(4)經(jīng)篩選獲得了一菌株,該菌株產生的纖維素酶是一種復合酶,包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,這三種酶的相對分子量分別為27000、35000和56000。采用凝膠色譜法將這三種酶分離時,最先洗脫出來的是葡萄糖苷酶
葡萄糖苷酶
(填“C1酶”、“Cx酶”或“葡萄糖苷酶”),其原因是利用凝膠色譜法分離不同相對分子量的蛋白質時,相對分子量較大的蛋白質無法進入凝膠內部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快,而葡萄糖苷酶的相對分子量大于C1酶、Cx酶,所以它最先洗脫出來
利用凝膠色譜法分離不同相對分子量的蛋白質時,相對分子量較大的蛋白質無法進入凝膠內部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快,而葡萄糖苷酶的相對分子量大于C1酶、Cx酶,所以它最先洗脫出來
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