神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)能在腫瘤細胞內(nèi)表達,是血管內(nèi)皮生長因子家族成員的受體,通過參與多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來促進腫瘤血管的生成。研究人員從腫瘤細胞中擴增出NRP-1基因并將其導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)進行發(fā)酵培養(yǎng),分離提純相應(yīng)NRP-1,并將其免疫小鼠,以制備抗NRP-1的單克隆抗體(NRP-1MAb)。分析回答下列問題:
(1)利用PCR技術(shù)可以從腫瘤細胞的基因組中分離擴增得到完整的NRP-1基因,其原因是根據(jù)目的基因兩端的堿基序列制備兩種引物,PCR技術(shù)根據(jù)DNA雙鏈復(fù)制的原理擴增目的基因根據(jù)目的基因兩端的堿基序列制備兩種引物,PCR技術(shù)根據(jù)DNA雙鏈復(fù)制的原理擴增目的基因。將擴增后的目的基因構(gòu)建成表達載體后,導(dǎo)入用鈣離子溶液鈣離子溶液處理的大腸桿菌體內(nèi)完成轉(zhuǎn)化。
(2)研究人員將分離提純的NRP-1免疫小鼠后,取其脾臟中B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上不能存活的是未融合細胞、B淋巴細胞自身融合的細胞和骨髓瘤細胞自身融合的細胞未融合細胞、B淋巴細胞自身融合的細胞和骨髓瘤細胞自身融合的細胞。選取檢測抗體陽性的雜交瘤細胞進行體外培養(yǎng)時需要的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的二氧化碳95%的空氣和5%的二氧化碳。
(3)為進一步確定NRP-1MAb靶向治療時的用藥方式,研究人員將直腸癌組織塊制成單細胞懸液,等量注入4組裸鼠右前腋下,接種3后天開始向培養(yǎng)液中施加NRP-1MAb藥物,每隔10天給藥1次,共4次。給藥后測算一次腫瘤體積,結(jié)果如圖所示:
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分析如圖可以得出的結(jié)論是多次注射NRP-1MAb可明顯抑制腫瘤生長,且高劑量組與中劑量組的抑制效果基本相同多次注射NRP-1MAb可明顯抑制腫瘤生長,且高劑量組與中劑量組的抑制效果基本相同。根據(jù)實驗結(jié)果,請給出使用NRP-1MAb進行靶向治療癌癥時的臨床建議:采用中劑量,每10天注射一次,連續(xù)注射4次采用中劑量,每10天注射一次,連續(xù)注射4次。
【答案】根據(jù)目的基因兩端的堿基序列制備兩種引物,PCR技術(shù)根據(jù)DNA雙鏈復(fù)制的原理擴增目的基因;鈣離子溶液;未融合細胞、B淋巴細胞自身融合的細胞和骨髓瘤細胞自身融合的細胞;95%的空氣和5%的二氧化碳;多次注射NRP-1MAb可明顯抑制腫瘤生長,且高劑量組與中劑量組的抑制效果基本相同;采用中劑量,每10天注射一次,連續(xù)注射4次
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:1難度:0.6
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞但細胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成,它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細胞技術(shù)(免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題:
(1)與植物體細胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對③篩選出的雜交瘤細胞,還需進行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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