甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì),將甜蛋白基因?qū)敕芽商岣叻烟鹞?,改善果?shí)品質(zhì),獲得超甜植株。如圖是甜蛋白基因和T質(zhì)粒上限制酶切位點(diǎn)示意圖。回答下列相關(guān)問(wèn)題:
(1)利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得超甜番茄的核心步驟是
構(gòu)建基因表達(dá)載體
構(gòu)建基因表達(dá)載體
,該過(guò)程需要選擇 XbaⅠ和HindⅢ
XbaⅠ和HindⅢ
限制酶切割甜蛋白基因。
(2)Ti質(zhì)粒上的啟動(dòng)子是 RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn),為了保證甜蛋白基因能夠在番茄細(xì)胞中表達(dá),應(yīng)將T質(zhì)粒上的啟動(dòng)子替換為 番茄細(xì)胞中能表達(dá)的基因的啟動(dòng)子
番茄細(xì)胞中能表達(dá)的基因的啟動(dòng)子
。
(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化番茄細(xì)胞時(shí),T-DNA的作用是 攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并將其整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上
攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并將其整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上
,該過(guò)程發(fā)生的變異類(lèi)型為 基因重組
基因重組
。然后在添加 卡那霉素
卡那霉素
物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)番茄細(xì)胞,篩選轉(zhuǎn)化成功的愈傷組織。
(4)若得到的超甜番茄體細(xì)胞中導(dǎo)入的是2個(gè)甜蛋白基因,則讓其自交,若子代表型及比例為 超甜番茄:普通番茄=15:1
超甜番茄:普通番茄=15:1
,說(shuō)明2個(gè)甜蛋白基因插入到了兩對(duì)同源染色體上(含有1個(gè)和2個(gè)甜蛋白基因的番茄甜味相同)。