逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是目前應(yīng)用較多的動(dòng)物基因工程載體之一。運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄病毒
載體可以將外源基因插入到受體細(xì)胞染色體,使外源基因隨染色體DNA一起復(fù)制和表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組的核心部分包括三個(gè)基因:Gag基因(編碼病毒的核心蛋白)、pol基因(編碼逆轉(zhuǎn)錄酶)、env基因(編碼病毒的表面糖蛋白)。位于這些基因的兩端有LTR序列(含有啟動(dòng)子、調(diào)節(jié)基因等),控制著逆轉(zhuǎn)錄基因組核心基因的表達(dá)及轉(zhuǎn)移。下圖是構(gòu)建逆轉(zhuǎn)錄病毒載體及用于培育轉(zhuǎn)基因小鼠的過(guò)程?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)逆轉(zhuǎn)錄病毒主要組成物質(zhì)有RNA和蛋白質(zhì)RNA和蛋白質(zhì)。
(2)催化過(guò)程①的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶,過(guò)程②③中需要的工具酶分別是限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶,過(guò)程④⑤常用的導(dǎo)入方法是顯微注射法顯微注射法。
(3)過(guò)程③中,外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR序列中的啟動(dòng)子后,其主要目的是控制外源基因的表達(dá)與轉(zhuǎn)移控制外源基因的表達(dá)與轉(zhuǎn)移。
(4)過(guò)程④中,導(dǎo)入病毒蛋白編碼基因(Gag、pol和env)的目的是合成組成病毒的蛋白質(zhì)合成組成病毒的蛋白質(zhì)。
(5)如利用牛乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素,則應(yīng)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),使目的基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,一般導(dǎo)入牛受精卵受精卵細(xì)胞中,最終牛的乳汁中就含有人胰島素。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】RNA和蛋白質(zhì);逆轉(zhuǎn)錄酶;限制酶和DNA連接酶;顯微注射法;控制外源基因的表達(dá)與轉(zhuǎn)移;合成組成病毒的蛋白質(zhì);乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子;受精卵
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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