日本結(jié)縷草是耐旱性最強(qiáng)的草坪草種之一,科研人員將日本結(jié)縷草中的抗旱基因F轉(zhuǎn)入擬南芥,培育抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥。請(qǐng)回答下列問題:
(1)從日本結(jié)縷草細(xì)胞中提取基因組DNA,進(jìn)而獲得基因F的啟動(dòng)子序列,啟動(dòng)子的作用是
啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
。提取日本結(jié)縷草相應(yīng)的mRNA,用反轉(zhuǎn)錄(或逆轉(zhuǎn)錄)
反轉(zhuǎn)錄(或逆轉(zhuǎn)錄)
的方法獲得cDNA再克隆基因F.構(gòu)建重組質(zhì)粒所用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)和DNA連接酶
限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)和DNA連接酶
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(2)將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌的感受態(tài)細(xì)胞,檢測(cè)基因F表達(dá)呈陽性的菌落,再將這些菌體與擬南芥細(xì)胞共同浸泡在相關(guān)的溶液中。上述操作的目的是利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)霐M南芥細(xì)胞
利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)霐M南芥細(xì)胞
。
(3)已知野生型擬南芥對(duì)草甘膦(一種除草劑)不具抗性。給獲得的抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥噴施一定濃度的草甘膦,挑選正常生長的植株,可篩選出成功轉(zhuǎn)化的擬南芥。由此說明重組質(zhì)粒中的標(biāo)記基因是抗草甘膦基因(或草甘膦抗性基因)
抗草甘膦基因(或草甘膦抗性基因)
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(4)常用分子雜交
分子雜交
的方法檢測(cè)基因F能否在擬南芥細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄。將抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥和野生型擬南芥置于干旱環(huán)境中培養(yǎng),若基因F能夠提高擬南芥的抗旱性,則預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥在干旱環(huán)境中的生長狀況優(yōu)于野生型擬南芥的
抗旱轉(zhuǎn)基因擬南芥在干旱環(huán)境中的生長狀況優(yōu)于野生型擬南芥的
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