吳茱萸是一種中藥,其主要成分為吳茱萸堿(EVO)。為研究EVO對人胃癌細胞增殖的影響及作用機制,科研人員做了以下實驗。請回答問題:
(1)檢測EVO對胃癌細胞BGC-823增殖的影響。
①用含動物血清的DME/F-12培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)BGC-823,動物血清的作用是
提供生長因子(或補充培養(yǎng)基中動物細胞生長需要的未知營養(yǎng))
提供生長因子(或補充培養(yǎng)基中動物細胞生長需要的未知營養(yǎng))
。
②取出上述培養(yǎng)的細胞,加入胰蛋白酶制成單
單
細胞懸液,置于加入不同濃度EVO的多孔板中進行培養(yǎng)。
③EVO對BGC-823細胞增殖影響的實驗結(jié)果如圖1.實驗結(jié)果表明吳茱萸堿抑制BGC-823細胞增殖;作用效果與作用時間和濃度呈正相關(guān)
吳茱萸堿抑制BGC-823細胞增殖;作用效果與作用時間和濃度呈正相關(guān)
。
(2)檢測EVO對BGC-823細胞周期的影響,結(jié)果如下表。
細胞周期中各期的細胞比例
組別 |
G0/G1期(%) |
S期(%) |
G2/M期(%) |
對照組 |
42.62 |
17.65 |
23.37 |
EVO組 |
8.57 |
19.30 |
54.13 |
據(jù)表可知,EVO能誘導細胞周期阻滯于
G2/M
G2/M
期。
(3)檢測EVO對BGC-823細胞周期和細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響,結(jié)果如圖2。
①根據(jù)上述實驗,可判斷
p53
p53
是細胞周期抑制蛋白,該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結(jié)合,抑制其
轉(zhuǎn)錄
轉(zhuǎn)錄
,從而抑制BGC-823細胞周期的運行。
②細胞凋亡蛋白Caspase-3表達量
上升
上升
,該蛋白參與細胞的
程序性
程序性
死亡過程。
(4)綜上所述,推測EVO對人胃癌細胞的作用機制是
EVO通過促進細胞周期抑制蛋白p53基因表達,從而抑制細胞周期蛋白Cdc25C基因表達,誘導胃癌細胞阻滯于G2/M期,抑制胃癌細胞增殖;同時,EVO促進細胞凋亡蛋白Caspase-3基因表達,促進胃癌細胞凋亡
EVO通過促進細胞周期抑制蛋白p53基因表達,從而抑制細胞周期蛋白Cdc25C基因表達,誘導胃癌細胞阻滯于G2/M期,抑制胃癌細胞增殖;同時,EVO促進細胞凋亡蛋白Caspase-3基因表達,促進胃癌細胞凋亡
。