PMI基因編碼6-磷酸甘露糖轉(zhuǎn)移酶,其產(chǎn)物可催化6-磷酸甘露糖轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸果糖被細(xì)胞利用。自然界的植物大多沒有PMI基因,且6-磷酸甘露糖不能被植物細(xì)胞利用。當(dāng)6-磷酸甘露糖積累到一定程度時(shí),會(huì)對細(xì)胞生長起抑制作用,只有轉(zhuǎn)入了外源PMI基因的轉(zhuǎn)化細(xì)胞才能利用6-磷酸甘露糖,為細(xì)胞正常生長提供能量,具有生長優(yōu)勢。科研人員擬用PMI基因替換質(zhì)粒 pCAMBIA1305里的潮霉素抗性基因Hyg,構(gòu)建植物表達(dá)載體 pCAMBIA1305-PMI,并轉(zhuǎn)入一種山東特產(chǎn)藥用植物--白花丹參,獲得轉(zhuǎn)基因白花丹參。請回答下列問題:
(1)在傳統(tǒng)基因工程方法中,質(zhì)粒 pCAMBIA1305中潮霉素抗性基因Hyg的作用是
鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,以便篩選出含有目的基因的細(xì)胞
鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,以便篩選出含有目的基因的細(xì)胞
。
(2)PMI基因存在如圖的基因組中,若使用PCR技術(shù)擴(kuò)增時(shí),可選擇圖中四種引物A、B、C、D中的引物B、C
B、C
,原因是PMI基因位于此片段的中間部位,DNA聚合酶只能從5'端向3′端延伸子鏈
PMI基因位于此片段的中間部位,DNA聚合酶只能從5'端向3′端延伸子鏈
,并且擴(kuò)增過程中需要Taq
Taq
酶催化。
(3)若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達(dá)載體 pCAMBIA1305-PMI導(dǎo)入白花丹參細(xì)胞中,需用Ca2+
Ca2+
處理農(nóng)桿菌,轉(zhuǎn)化成功的白花丹參細(xì)胞能
能
(填“能”或“不能”)在含有6-磷酸甘露糖的植物組織培養(yǎng)基上正常生長,原因是轉(zhuǎn)化成功的白花丹參細(xì)胞中含有PMI基因,能利用6-磷酸甘露糖為自身生命活動(dòng)提供能量
轉(zhuǎn)化成功的白花丹參細(xì)胞中含有PMI基因,能利用6-磷酸甘露糖為自身生命活動(dòng)提供能量
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