為增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連,導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得轉(zhuǎn)基因油菜品種.
(1)研究人員從陸地棉細(xì)胞中獲取酶D基因,從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因,如圖為所示限制酶的識(shí)別位點(diǎn).這樣可以用Cla1(限制酶)和DNA連接酶Cla1(限制酶)和DNA連接酶(填酶)處理兩個(gè)基因后,可得到A、DA、D端(填圖中字母)相連的融合基因.
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(2)將上述融合基因插入如圖2所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中.構(gòu)建充足質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中.將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落,再利用培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液.
(3)剪取油菜的葉片放入染液中一段時(shí)間,此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞,經(jīng)篩選后再將該油菜細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)獲因油菜.整個(gè)過程涉及的原理是基因重組和植物細(xì)胞的全能性基因重組和植物細(xì)胞的全能性.
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】Cla1(限制酶)和DNA連接酶;A、D;四環(huán)素;基因重組和植物細(xì)胞的全能性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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