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中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關(guān)鍵酶基因(PDC)密切相關(guān),推測澀味程度可能與PDC基因的表達情況有關(guān)。
(1)啟動子位于基因首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點,同時啟動子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結(jié)合位點,RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的
轉(zhuǎn)錄水平
轉(zhuǎn)錄水平
。
(2)為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白,科研人員進行了下列實驗。
①PDC基因的啟動子序列未知,為獲得大量該基因啟動子所在片段,可利用限制酶將基因組DNA進行酶切,然后在
DNA連接酶
DNA連接酶
的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游,根據(jù)
接頭片段
接頭片段
和PDC基因編碼序列設(shè)計引物進行PCR.利用質(zhì)粒A(圖1)構(gòu)建含有PDC基因啟動子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌,用不含
尿嘧啶
尿嘧啶
的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。
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②質(zhì)粒G(圖2)上的AD基因表達出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時,能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄,因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選??蒲腥藛T從中國甜柿中提取RNA,將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌,此時應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點
4
4
(填序號1~5)作為cDNA的插入位點,最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
③重組酵母Y187與Y1H能夠進行接合生殖,形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存,則推測待測蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白,請結(jié)合圖示闡述作出該推測的理由。

【答案】轉(zhuǎn)錄水平;DNA連接酶;接頭片段;尿嘧啶;4
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:82引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)在進行基因工程操作時,先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
     

    (2)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達,需要構(gòu)建基因表達載體,其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外,還包括
     
    、
     
    、
     
    ,其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關(guān)。
    (3)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)如何從個體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力?
     
    。
    (5)若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株,但植株抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
  • 2.油菜是世界上重要的油料作物,其生長期常受到病蟲害的危害,其中80%是由病原真菌引起。過去對油菜真菌病害的控制主要使用化學(xué)殺菌劑;真菌的細(xì)胞壁由幾丁質(zhì)組成,現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因(如圖1)注入油菜(本身無幾丁質(zhì)酶基因)中從而提高油菜的抗真菌能力,該過程利用了限制性核酸內(nèi)切酶(如圖2)。請回答下列問題:
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    (1)據(jù)圖2寫出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列:
     
    。形成重組DNA分子時,含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身
     

    (2)將重組DNA導(dǎo)入油菜細(xì)胞的常用方法是
     
    。為了檢測油菜細(xì)胞是否成功導(dǎo)入幾丁質(zhì)酶基因,可利用
     
    制成的探針進行檢測。
    (3)將轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗,過程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中
     
    的配比,幼苗可置于有
     
    的環(huán)境中,檢測幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達。
    (4)采用化學(xué)殺蟲劑在消滅真菌病害的同時,也污染了
     
    (至少2種)等無機環(huán)境,更為重要的是使得
     
    迅速減少。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:3引用:1難度:0.7
  • 3.已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-,根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是(  )
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    發(fā)布:2024/10/31 13:0:2組卷:46引用:2難度:0.7
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