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二十碳五烯酸(EPA)能促進體內(nèi)飽和脂肪酸代謝,是人體自身不能直接從頭合成但又不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)。獲取EPA產(chǎn)品的主要途徑是從魚油等海洋漁業(yè)資源中提取。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)從海洋細菌中提取了EPA合成途徑的關(guān)鍵基因pfaB,并將其導入酵母菌內(nèi),通過酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)EPA,相關(guān)過程如圖所示,請回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)PCR技術(shù)遵循的基本原理是
DNA半保留復制
DNA半保留復制
,在第
輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段(pfaB基因)。
(2)利用PCR擴增pfaB基因時,需將溫度上升到90℃后再降溫至50℃,其目的是
使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后,便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合
使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后,便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合
。
(3)表達載體含有啟動子,啟動子是指
位于基因首端的一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
位于基因首端的一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
。
(4)將pfaB-pPIC9表達載體導入酵母菌前,需先將表達載體導入大腸桿菌并進行篩選,篩選時培養(yǎng)基中應加入
氨芐青霉素
氨芐青霉素
,再將含有表達載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中,通過電激將大腸桿菌導入酵母菌,該表達載體在酵母菌中不會隨著酵母菌繁殖而丟失的原因是
表達載體上含有真核生物復制原點,能在酵母菌中復制
表達載體上含有真核生物復制原點,能在酵母菌中復制
。

【答案】DNA半保留復制;三;使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后,便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合;位于基因首端的一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;氨芐青霉素;表達載體上含有真核生物復制原點,能在酵母菌中復制
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/7 8:0:9組卷:0引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.全面接種新冠疫苗可有效防止新冠病毒的大規(guī)模傳染。新冠疫苗有多種類型,如滅活疫苗、重組疫苗、mRNA疫苗等。重組疫苗的研發(fā)可以利用腺病毒作為載體。請回答下列問題:
    (1)新冠病毒依賴其表面的S蛋白與宿主細胞膜上ACE2受體結(jié)合而最終實現(xiàn)感染。ACE2受體的化學本質(zhì)是
     
    。該結(jié)合過程體現(xiàn)了細胞膜
     
    功能。
    (2)新冠病毒是一種RNA病毒。研制疫苗時,需利用RT-PCR技術(shù)獲取S蛋白基因,該過程除逆轉(zhuǎn)錄酶外,還有
     
    酶參與,此酶需要
     
    (離子)的激活。PCR的最后一個循環(huán)結(jié)束后通常還需要在72℃維持7min左右,其目的是
     

    (3)腺病毒是一種DNA病毒,基因組中的E基因與其復制有關(guān)。將其作為運載S蛋白基因的載體時,需對腺病毒進行的改造是
     
    ,以提高該種新冠疫苗的安全性。
    (4)接種滅活疫苗一般需2~3次,而接種重組DNA疫苗一般只需1次,根據(jù)疫苗作用原理和人體特異性免疫反應機制分析,可能的原因是
     
    。
    (5)在基因組中敲除并整合基因,其技術(shù)流程通常如圖1所示。
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    ①利用大腸桿菌DNA進行PCR,無需從細胞中提取DNA,可在培養(yǎng)出菌落后直接挑取菌落進行,分析其原因是
     
    ,DNA得以釋放。
    ②利用PCR獲得對應產(chǎn)物的關(guān)鍵是
     
    設計。
    ③PCR5時需要加入的引物是
     
    。
    ④利用電泳技術(shù)鑒定PCR產(chǎn)物,結(jié)果如圖2。其中陽性泳道使用的樣品是熒光基因M,可與待測泳道中DNA進行對比;標準泳道使用的樣品是不同已知長度(大小)的DNA片段,作用是
     
    。

    發(fā)布:2024/9/9 4:0:8組卷:9引用:2難度:0.6
  • 2.“微衛(wèi)星DNA”是一類廣泛分布于真核生物核DNA中的簡單重復序列,以1~6個核苷酸為基本單位,重復次數(shù)在不同個體和品種間有較大可變性,可作為一種標記對基因進行定位。
    (1)由于兩側(cè)序列高度保守,可利用PCR技術(shù)對重復次數(shù)不同的微衛(wèi)星DNA加以鑒定,如圖1.請在方框中補充C組PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果的大致位置。
     

    菁優(yōu)網(wǎng)
    (2)研究人員以純種紫心大白菜為父本、純種非紫心大白菜為母本進行雜交,F(xiàn)1自交后共收獲F2植株330株,其中紫心245株,非紫心85株。實驗結(jié)果表明
     
    是顯性性狀,推測相關(guān)基因的傳遞符合
     
    定律。
    (3)為了對大白菜的紫心基因進行有效標記和定位,研究人員針對已知的微衛(wèi)星標記A710兩側(cè)序列設計引物,并對兩親本和部分F2個體的DNA進行PCR擴增,產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖2.由此初步推測:大白菜紫心、非紫心基因與標記A710位于同一對染色體上。圖2紫心F2單株中,最可能是雜合子的有
     
    (填數(shù)字編號)。若上述推測成立,請解釋非紫心F2單株中10號和12號擴增后的電泳結(jié)果
     
    。
    (4)研究人員發(fā)現(xiàn),位于標記A710附近的Br基因內(nèi)部存在CTC重復序列,且該序列在兩親本中重復次數(shù)不同,如圖3所示。對全部F2個體中的Br基因片段進行PCR擴增,如果
     
    個體的擴增結(jié)果中有長度為78個堿基對的片段,
     
    個體的擴增結(jié)果中有長度為87個堿基對的片段,則可證明大白菜紫心和非紫心基因與Br基因位于同一對染色體上且完全連鎖,由此可知Br基因可對大白菜紫心基因進行更有效的標記和定位。
    (5)根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點判斷,應用這種標記可進行的研究有
     
    (填字母)。
    A.人類親子鑒定              B.物種或品種間親緣關(guān)系鑒定
    C.誘導基因突變              D.物種和基因多樣性研究

    發(fā)布:2024/9/19 2:0:8組卷:48引用:2難度:0.3
  • 3.下列關(guān)于PCR的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/25 17:30:2組卷:18引用:2難度:0.7
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