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二十碳五烯酸（EPA）能促進體內(nèi)飽和脂肪酸代謝，是人體自身不能直接從頭合成但又不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)。獲取EPA產(chǎn)品的主要途徑是從魚油等海洋漁業(yè)資源中提取。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)從海洋細菌中提取了EPA合成途徑的關(guān)鍵基因pfaB，并將其導入酵母菌內(nèi)，通過酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)EPA，相關(guān)過程如圖所示，請回答下列問題：
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（1）PCR技術(shù)遵循的基本原理是
DNA半保留復制
DNA半保留復制
，在第
三
三
輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段（pfaB基因）。
（2）利用PCR擴增pfaB基因時，需將溫度上升到90℃后再降溫至50℃，其目的是
使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合
使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合
。
（3）表達載體含有啟動子，啟動子是指
位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
。
（4）將pfaB-pPIC9表達載體導入酵母菌前，需先將表達載體導入大腸桿菌并進行篩選，篩選時培養(yǎng)基中應加入
氨芐青霉素
氨芐青霉素
，再將含有表達載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中，通過電激將大腸桿菌導入酵母菌，該表達載體在酵母菌中不會隨著酵母菌繁殖而丟失的原因是
表達載體上含有真核生物復制原點，能在酵母菌中復制
表達載體上含有真核生物復制原點，能在酵母菌中復制
。

【答案】DNA半保留復制；三；使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合；位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；氨芐青霉素；表達載體上含有真核生物復制原點，能在酵母菌中復制
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/5/7 8:0:9組卷：0引用：1難度：0.6
相似題

  • 1．全面接種新冠疫苗可有效防止新冠病毒的大規(guī)模傳染。新冠疫苗有多種類型，如滅活疫苗、重組疫苗、mRNA疫苗等。重組疫苗的研發(fā)可以利用腺病毒作為載體。請回答下列問題：
    （1）新冠病毒依賴其表面的S蛋白與宿主細胞膜上ACE2受體結(jié)合而最終實現(xiàn)感染。ACE2受體的化學本質(zhì)是
     
    。該結(jié)合過程體現(xiàn)了細胞膜
     
    功能。
    （2）新冠病毒是一種RNA病毒。研制疫苗時，需利用RT-PCR技術(shù)獲取S蛋白基因，該過程除逆轉(zhuǎn)錄酶外，還有
     
    酶參與，此酶需要
     
    （離子）的激活。PCR的最后一個循環(huán)結(jié)束后通常還需要在72℃維持7min左右，其目的是
     

    （3）腺病毒是一種DNA病毒，基因組中的E基因與其復制有關(guān)。將其作為運載S蛋白基因的載體時，需對腺病毒進行的改造是
     
    ，以提高該種新冠疫苗的安全性。
    （4）接種滅活疫苗一般需2～3次，而接種重組DNA疫苗一般只需1次，根據(jù)疫苗作用原理和人體特異性免疫反應機制分析，可能的原因是
     
    。
    （5）在基因組中敲除并整合基因，其技術(shù)流程通常如圖1所示。
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    ①利用大腸桿菌DNA進行PCR，無需從細胞中提取DNA，可在培養(yǎng)出菌落后直接挑取菌落進行，分析其原因是
     
    ，DNA得以釋放。
    ②利用PCR獲得對應產(chǎn)物的關(guān)鍵是
     
    設計。
    ③PCR5時需要加入的引物是
     
    。
    ④利用電泳技術(shù)鑒定PCR產(chǎn)物，結(jié)果如圖2。其中陽性泳道使用的樣品是熒光基因M，可與待測泳道中DNA進行對比；標準泳道使用的樣品是不同已知長度（大小）的DNA片段，作用是
     
    。

    發(fā)布：2024/9/9 4:0:8組卷：9引用：2難度：0.6

  • 2．“微衛(wèi)星DNA”是一類廣泛分布于真核生物核DNA中的簡單重復序列，以1～6個核苷酸為基本單位，重復次數(shù)在不同個體和品種間有較大可變性，可作為一種標記對基因進行定位。
    （1）由于兩側(cè)序列高度保守，可利用PCR技術(shù)對重復次數(shù)不同的微衛(wèi)星DNA加以鑒定，如圖1．請在方框中補充C組PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果的大致位置。
     

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    （2）研究人員以純種紫心大白菜為父本、純種非紫心大白菜為母本進行雜交，F(xiàn)1自交后共收獲F2植株330株，其中紫心245株，非紫心85株。實驗結(jié)果表明
     
    是顯性性狀，推測相關(guān)基因的傳遞符合
     
    定律。
    （3）為了對大白菜的紫心基因進行有效標記和定位，研究人員針對已知的微衛(wèi)星標記A710兩側(cè)序列設計引物，并對兩親本和部分F2個體的DNA進行PCR擴增，產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖2．由此初步推測：大白菜紫心、非紫心基因與標記A710位于同一對染色體上。圖2紫心F2單株中，最可能是雜合子的有
     
    （填數(shù)字編號）。若上述推測成立，請解釋非紫心F2單株中10號和12號擴增后的電泳結(jié)果
     
    。
    （4）研究人員發(fā)現(xiàn)，位于標記A710附近的Br基因內(nèi)部存在CTC重復序列，且該序列在兩親本中重復次數(shù)不同，如圖3所示。對全部F2個體中的Br基因片段進行PCR擴增，如果
     
    個體的擴增結(jié)果中有長度為78個堿基對的片段，
     
    個體的擴增結(jié)果中有長度為87個堿基對的片段，則可證明大白菜紫心和非紫心基因與Br基因位于同一對染色體上且完全連鎖，由此可知Br基因可對大白菜紫心基因進行更有效的標記和定位。
    （5）根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點判斷，應用這種標記可進行的研究有
     
    （填字母）。
    A．人類親子鑒定              B．物種或品種間親緣關(guān)系鑒定
    C．誘導基因突變              D．物種和基因多樣性研究

    發(fā)布：2024/9/19 2:0:8組卷：48引用：2難度：0.3

  • 3．下列關(guān)于PCR的敘述，正確的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/10/25 17:30:2組卷：18引用：2難度：0.7
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