[生物--選修1：生物技術(shù)實(shí)踐]
細(xì)胞固定化技術(shù)是現(xiàn)代生物工程領(lǐng)域重要技術(shù)之一。酵母細(xì)胞固定化工藝流程如下：
釀酒干酵母→活化→海藻酸鈉→氯化鈣溶液→凝膠→無(wú)菌水洗滌→平衡、固化→固定化酵母?？蒲腥藛T對(duì)固定化酵母細(xì)胞的試驗(yàn)條件進(jìn)行分析，結(jié)果如下：
| 項(xiàng)目 |
氯，化鈣/（moL/L） |
| 0.2 |
0.8 |
1.4 |
2.0 |
2.6 |
| 發(fā)酵液殘?zhí)橇?% |
2.6 |
2.6 |
2.5 |
2.4 |
2.5 |
| 發(fā)酵液酒精度/% |
6.5 |
6.4 |
6.4 |
6.7 |
6.1 |
| 固定化酵母強(qiáng)度 |
+ |
++ |
+++ |
+++ |
+++ |
表1 氯化鈣濃度對(duì)固定化酵母特性的影響
| 項(xiàng)目 |
海藻酸鈉/% |
| 2.0 |
3.0 |
4.0 |
5.0 |
6.0 |
| 發(fā)酵液殘?zhí)橇?% |
2.5 |
2.4 |
2.8 |
3.2 |
3.8 |
| 發(fā)酵液酒精度/% |
6.5 |
6.7 |
6.3 |
6.3 |
5.9 |
| 固定化酵母強(qiáng)度 |
+++
|
+++
|
+++
|
+++
|
+++
|
表2 海藻酸鈉濃度對(duì)固定化酵母特性的影響
注：（凝膠球的硬度）+軟，++硬，+++較硬：發(fā)酹溫度：28℃，發(fā)酵pH：3
（1）酵母細(xì)胞活化的作用是
讓處于休眠狀態(tài)的微生物恢復(fù)正常生活狀態(tài)
讓處于休眠狀態(tài)的微生物恢復(fù)正常生活狀態(tài)
；由表1可知，隨著Ca
2+濃度的增大，固定化酵母強(qiáng)度
增強(qiáng)
增強(qiáng)
（增強(qiáng)、減弱），而發(fā)酵液的殘?zhí)橇考熬凭繜o(wú)明顯變化；由表2可知，隨著海藻酸鈉濃度的增大，發(fā)酵液殘?zhí)橇可?，酒精度下降，固定化酵母?qiáng)度無(wú)明顯變化；由此表明
海藻酸鈉的濃度
海藻酸鈉的濃度
是決定糖液滲透到固定化酵母細(xì)胞的重要因素。
（2）當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí)，凝膠相對(duì)滲透性增強(qiáng)，有利于底物的進(jìn)入和產(chǎn)物的排出，但濃度過(guò)低會(huì)導(dǎo)致
包埋的酵母細(xì)胞數(shù)量少
包埋的酵母細(xì)胞數(shù)量少
。
（3）海藻酸鈉在水中溶解速度較慢，需要通過(guò)加熱促進(jìn)其溶解，溶解海藻酸鈉時(shí)，最好采用的方法
小火間斷加熱
小火間斷加熱
，原因是
如果加熱太快，容易造成海藻酸鈉焦糊
如果加熱太快，容易造成海藻酸鈉焦糊
。
（4）一般來(lái)說(shuō)，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定，而細(xì)胞常采用包埋法固定原因是
細(xì)胞體積大，而酶分子??；體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的酶容易從包埋材料中漏出
細(xì)胞體積大，而酶分子?。惑w積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的酶容易從包埋材料中漏出
。
（5）如果想要反復(fù)使用固定化酵母細(xì)胞，細(xì)胞固定化要在嚴(yán)格無(wú)菌條件下進(jìn)行，原因是
避免其他微生物污染
避免其他微生物污染
。
