[生物--選修1：生物技術(shù)實踐]
細(xì)胞固定化技術(shù)是現(xiàn)代生物工程領(lǐng)域重要技術(shù)之一。酵母細(xì)胞固定化工藝流程如下：
釀酒干酵母→活化→海藻酸鈉→氯化鈣溶液→凝膠→無菌水洗滌→平衡、固化→固定化酵母。科研人員對固定化酵母細(xì)胞的試驗條件進行分析，結(jié)果如下：

項目	氯，化鈣/（moL/L）
	0.2	0.8	1.4	2.0	2.6
發(fā)酵液殘?zhí)橇?%	2.6	2.6	2.5	2.4	2.5
發(fā)酵液酒精度/%	6.5	6.4	6.4	6.7	6.1
固定化酵母強度	+	++	+++	+++	+++

表1 氯化鈣濃度對固定化酵母特性的影響

項目	海藻酸鈉/%
	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0
發(fā)酵液殘?zhí)橇?%	2.5	2.4	2.8	3.2	3.8
發(fā)酵液酒精度/%	6.5	6.7	6.3	6.3	5.9
固定化酵母強度	+++	+++	+++	+++	+++

表2 海藻酸鈉濃度對固定化酵母特性的影響
注：（凝膠球的硬度）+軟，++硬，+++較硬：發(fā)酹溫度：28℃，發(fā)酵pH：3
（1）酵母細(xì)胞活化的作用是

讓處于休眠狀態(tài)的微生物恢復(fù)正常生活狀態(tài)

讓處于休眠狀態(tài)的微生物恢復(fù)正常生活狀態(tài)

；由表1可知，隨著Ca²⁺濃度的增大，固定化酵母強度

增強

增強

（增強、減弱），而發(fā)酵液的殘?zhí)橇考熬凭繜o明顯變化；由表2可知，隨著海藻酸鈉濃度的增大，發(fā)酵液殘?zhí)橇可?，酒精度下降，固定化酵母強度無明顯變化；由此表明

海藻酸鈉的濃度

海藻酸鈉的濃度

是決定糖液滲透到固定化酵母細(xì)胞的重要因素。
（2）當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時，凝膠相對滲透性增強，有利于底物的進入和產(chǎn)物的排出，但濃度過低會導(dǎo)致

包埋的酵母細(xì)胞數(shù)量少

包埋的酵母細(xì)胞數(shù)量少

。
（3）海藻酸鈉在水中溶解速度較慢，需要通過加熱促進其溶解，溶解海藻酸鈉時，最好采用的方法

小火間斷加熱

小火間斷加熱

，原因是

如果加熱太快，容易造成海藻酸鈉焦糊

如果加熱太快，容易造成海藻酸鈉焦糊

。
（4）一般來說，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定，而細(xì)胞常采用包埋法固定原因是

細(xì)胞體積大，而酶分子??；體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的酶容易從包埋材料中漏出

細(xì)胞體積大，而酶分子?。惑w積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的酶容易從包埋材料中漏出

。
（5）如果想要反復(fù)使用固定化酵母細(xì)胞，細(xì)胞固定化要在嚴(yán)格無菌條件下進行，原因是

避免其他微生物污染

避免其他微生物污染

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