凝乳酶是奶制品加工中經(jīng)常用到的一種酶，其傳統(tǒng)制備方法的產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足生產(chǎn)需要?？茖W(xué)家研究利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)凝乳酶，其部分環(huán)節(jié)如圖所示。

回答下列問題：
（1）從剛出生5天的小牛皺胃組織中提取總RNA，經(jīng)

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

過程獲得總cDNA。通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性擴(kuò)增出凝乳酶基因，原因是

PCR過程中使用的引物能與凝乳酶基因的cDNA特異性結(jié)合

PCR過程中使用的引物能與凝乳酶基因的cDNA特異性結(jié)合

。
（2）過程①所使用的工具酶有

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

。凝乳酶基因和質(zhì)粒上均有NdeI和Xhol兩種酶的識(shí)別序列，分別是-C^↓ATATG-，-C^↓TCGAG-。用以上兩種酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，得到的黏性末端分別為

。
（3）大腸桿菌作為凝乳酶基因受體細(xì)胞的主要優(yōu)點(diǎn)有：

繁殖快，易培養(yǎng)，遺傳物質(zhì)較少等

繁殖快，易培養(yǎng)，遺傳物質(zhì)較少等

（答出兩點(diǎn)）。
（4）篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，經(jīng)多代培養(yǎng)后，仍能從大腸桿菌中提取出凝乳酶基因。據(jù)此判斷，你認(rèn)為凝乳酶基因是否已在大腸桿菌中成功轉(zhuǎn)化？請(qǐng)說明你的觀點(diǎn)及理由：

不一定，轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，僅從大腸桿菌中提取到凝乳酶基因不能說明該基因是否有正常表達(dá)

不一定，轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，僅從大腸桿菌中提取到凝乳酶基因不能說明該基因是否有正常表達(dá)

。