[選修3:現(xiàn)代生物科技專題]
研究發(fā)現(xiàn),某些植物的種子脫水?dāng)?shù)十年后復(fù)水仍能夠恢復(fù)活性,原因是細(xì)胞中積累了海藻糖??蒲腥藛T擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉(zhuǎn)入小麥中。如圖中標(biāo)注了載體、Bar體記基因(抗除草劑基因)、TPS基因的酶切位點(diǎn)和預(yù)期的基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)。
科研人員利用PCR技術(shù)獲得大量的TPS基因?,F(xiàn)將2種引物的一側(cè)添加限制酶識(shí)別序列(表格列舉了限制酶的識(shí)別序列),這樣TPS基因的PCR產(chǎn)物和載體用相同的限制酶切制后,可利用DNA連接酶將TPS基因拼接到載體的切口處,形成基因表達(dá)載體。
酶 | BamHⅠ | SacⅠ | HindⅢ | XbaⅠ |
識(shí)別序列 | 5′-GGATCC | 5′-GAGCTC | 5′-AAGCTT | 5′-TCTAGA |
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(1)據(jù)圖分析,在TPS基因兩側(cè)引入的是
BamHⅠ、SacⅠ
BamHⅠ、SacⅠ
限制酶的酶切位點(diǎn)。設(shè)計(jì)的引物序列為 5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
。(2)在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)入目的基因時(shí),需將TPS基因插入到質(zhì)粒的T-DNA中,原因是
T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上
T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上
。將攜帶了TPS基因的農(nóng)桿菌和小麥薄壁組織細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí),需用酚類化合物對(duì)小麥細(xì)胞進(jìn)行處理,這種處理的作用是 吸引農(nóng)桿菌對(duì)小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染
吸引農(nóng)桿菌對(duì)小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染
。(3)為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有TPS基因,基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入細(xì)胞后,在獲得的小麥植株葉片上涂抹
除草劑
除草劑
(填“除草劑”或“海藻糖“),篩選出抗除草劑個(gè)體??茖W(xué)家將生長(zhǎng)健壯、苗齡一致的抗除草劑小麥植株(實(shí)驗(yàn)組)與非抗除草劑小麥植株(對(duì)照組)進(jìn)行培育,鑒定兩組個(gè)體之間的 海藻糖
海藻糖
(填“除草劑”或“海藻糖”)的含量,如果 實(shí)驗(yàn)組積累的海藻糖明顯高于對(duì)照組
實(shí)驗(yàn)組積累的海藻糖明顯高于對(duì)照組
,則說(shuō)明獲得了細(xì)胞中積累了海藻糖的小麥優(yōu)質(zhì)品種。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】BamHⅠ、SacⅠ;5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT;T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上;吸引農(nóng)桿菌對(duì)小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染;除草劑;海藻糖;實(shí)驗(yàn)組積累的海藻糖明顯高于對(duì)照組
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.6
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