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[選修3:現(xiàn)代生物科技專題]
研究發(fā)現(xiàn),某些植物的種子脫水?dāng)?shù)十年后復(fù)水仍能夠恢復(fù)活性,原因是細(xì)胞中積累了海藻糖??蒲腥藛T擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉(zhuǎn)入小麥中。如圖中標(biāo)注了載體、Bar體記基因(抗除草劑基因)、TPS基因的酶切位點(diǎn)和預(yù)期的基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)。
科研人員利用PCR技術(shù)獲得大量的TPS基因?,F(xiàn)將2種引物的一側(cè)添加限制酶識別序列(表格列舉了限制酶的識別序列),這樣TPS基因的PCR產(chǎn)物和載體用相同的限制酶切制后,可利用DNA連接酶將TPS基因拼接到載體的切口處,形成基因表達(dá)載體。
BamHⅠ SacⅠ HindⅢ XbaⅠ
識別序列 5′-GGATCC 5′-GAGCTC 5′-AAGCTT 5′-TCTAGA
回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)據(jù)圖分析,在TPS基因兩側(cè)引入的是
BamHⅠ、SacⅠ
BamHⅠ、SacⅠ
限制酶的酶切位點(diǎn)。設(shè)計(jì)的引物序列為
5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
。
(2)在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)入目的基因時(shí),需將TPS基因插入到質(zhì)粒的T-DNA中,原因是
T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上
T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上
。將攜帶了TPS基因的農(nóng)桿菌和小麥薄壁組織細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí),需用酚類化合物對小麥細(xì)胞進(jìn)行處理,這種處理的作用是
吸引農(nóng)桿菌對小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染
吸引農(nóng)桿菌對小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染
。
(3)為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有TPS基因,基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入細(xì)胞后,在獲得的小麥植株葉片上涂抹
除草劑
除草劑
(填“除草劑”或“海藻糖“),篩選出抗除草劑個(gè)體??茖W(xué)家將生長健壯、苗齡一致的抗除草劑小麥植株(實(shí)驗(yàn)組)與非抗除草劑小麥植株(對照組)進(jìn)行培育,鑒定兩組個(gè)體之間的
海藻糖
海藻糖
(填“除草劑”或“海藻糖”)的含量,如果
實(shí)驗(yàn)組積累的海藻糖明顯高于對照組
實(shí)驗(yàn)組積累的海藻糖明顯高于對照組
,則說明獲得了細(xì)胞中積累了海藻糖的小麥優(yōu)質(zhì)品種。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】BamHⅠ、SacⅠ;5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT;T-DNA能轉(zhuǎn)移并整合到小麥染色體DNA上;吸引農(nóng)桿菌對小麥細(xì)胞進(jìn)行侵染;除草劑;海藻糖;實(shí)驗(yàn)組積累的海藻糖明顯高于對照組
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中,進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達(dá)載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測,相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明
     
    。
    組別 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品
    將TI注射到大白
    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進(jìn)行混合檢測
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列。回答下列問題。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是
     
    。
    (3)導(dǎo)入目的基因時(shí),首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上,挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細(xì)胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 3.我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,下列說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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