Bt抗蟲蛋白具有抵抗蟲害的作用。為獲取大量Bt抗蟲蛋白，研究者從基因數(shù)據(jù)庫中獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡稱Bt-Cry1基因），如圖1所示；通過基因工程技術(shù)利用大腸桿菌表達該蛋白，所用載體如圖2所示，箭頭表示不同限制酶的酶切位點。
回答下列問題：
（1）根據(jù)圖中信息，可選用 PvuⅡ、EcoRⅠPvuⅡ、EcoRⅠ兩種限制酶切割含目的基因的DNA片段和載體，使目的基因與載體高效重組，若選用PstⅠ進行切割，會造成 目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接。限制酶來源于原核生物，不會切割本身的DNA分子是因為 含有某種限制酶的原核生物，其DNA分子中不存在該酶的識別序列或識別序列已經(jīng)被修飾含有某種限制酶的原核生物，其DNA分子中不存在該酶的識別序列或識別序列已經(jīng)被修飾。
（2）基因表達載體中必須含有啟動子和終止子，其中啟動子的作用是 與RNA聚合酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出RNA與RNA聚合酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出RNA，圖中氨芐青霉素抗性基因的作用是 作為標記基因，檢測Bt-Cry1基因是否導入大腸桿菌細胞作為標記基因，檢測Bt-Cry1基因是否導入大腸桿菌細胞。
（3）導入目的基因時，首先用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌使其成為能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)的細胞，再將重組載體溶于緩沖液中與受體細胞混合；在一定的溫度下可以促進大腸桿菌完成 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化過程。
（4）檢測和鑒定目的基因是否在大腸桿菌中成功表達的方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PvuⅡ、EcoRⅠ；目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接；含有某種限制酶的原核生物，其DNA分子中不存在該酶的識別序列或識別序列已經(jīng)被修飾；與RNA聚合酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出RNA；作為標記基因，檢測Bt-Cry1基因是否導入大腸桿菌細胞；Ca2+；轉(zhuǎn)化；抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：9引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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