現(xiàn)有重組質(zhì)粒甲（共含2686個堿基對，不含T-DNA）和乙，為避免基因反接，研究人員用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重組質(zhì)粒甲、乙，再利用所得片段構(gòu)建了重組質(zhì)粒丙（如圖所示），然后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將丙導入胡蘿卜愈傷組織細胞。培養(yǎng)后得到轉(zhuǎn)VP1基因胡蘿卜植株。請回答：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒丙的目的是將VP1基因插入到T-DNAT-DNA中，從而使VP1基因進入植物細胞后，能整合到染色體的DNA上。利用重組質(zhì)粒甲、乙構(gòu)建丙的過程中，用到的工具酶是限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶。
（2）將重組質(zhì)粒甲、乙和丙進行分組，每組只含其中一種重組質(zhì)粒，同時用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割，結(jié)果如表所示：
| 組別 | 切割后所得DNA片段的情況 |
| 第1組 | 只得到含有2146和540個堿基對的2種DNA片段 |
| 第2組 | 只得到含有540和12400個堿基對的2種DNA片段 |
| 第3組 | 只得到含有12400和1000個堿基對的2種DNA片段 |
0
0
個游離的磷酸基團，限制酶Ⅰ在重組質(zhì)粒甲中有1
1
個切割位點，表中第2
2
組是切割重組質(zhì)粒丙的結(jié)果。（3）在植物組織培養(yǎng)過程中需要無菌操作，因此對外植體（離體的組織塊）要進行
消毒
消毒
處理。用于培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基不適用于培養(yǎng)胚狀體，原因是培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同
培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】T-DNA；限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶；0；1；2；消毒；培養(yǎng)基中添加的植物激素（植物生長調(diào)節(jié)劑）的種類和含量比例有所不同
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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