科研人員利用基因工程構建了超量表達蛋白的轉基因玉米。在超量表達X基因載體的構建中，所用的含目的基因的DNA片段和根瘤農桿菌Ti質粒的酶切位點如圖1所示，其中強啟動子具有結合RNA聚合酶且能多次啟動轉錄的功能；X蛋白在不同玉米株系的表達量如圖2所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）為使X基因在玉米植株中超量表達，應優(yōu)先選用 BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ酶組合，將目的基因片段插入T-DNA區(qū)段，其中T-DNA的作用是 T-DNA可以將強啟動子和X基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上T-DNA可以將強啟動子和X基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上。
（2）可在農桿菌培養(yǎng)基中加入卡那霉素以篩選 成功導入超量表達X基因載體成功導入超量表達X基因載體的農桿菌，得到的農桿菌與玉米愈傷組織混合培養(yǎng)，在接下來的篩選過程中，除了以X基因為模板設計探針進行DNA分子雜交外，還可以通過 在培養(yǎng)基中添加潮霉素/以X基因為模板設計探針與X基因mRNA雜交/以X蛋白為抗體，獲得特異性抗原探針，以愈傷組織表達的X蛋白雜交在培養(yǎng)基中添加潮霉素/以X基因為模板設計探針與X基因mRNA雜交/以X蛋白為抗體，獲得特異性抗原探針，以愈傷組織表達的X蛋白雜交鑒別導入T-DNA序列的愈傷組織。
（3）篩選出的愈傷組織經過誘導，分化成 芽和根的分生組織（叢狀苗或幼苗）芽和根的分生組織（叢狀苗或幼苗），最終獲得多個轉基因玉米株系。在誘導形成愈傷組織和愈傷組織再分化形成植株過程需要更換新的培養(yǎng)基，原因是：這兩個過程所需的營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑配比不同這兩個過程所需的營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑配比不同。待生根后，將苗移栽至蛭石中，逐漸 降低環(huán)境濕度降低環(huán)境濕度進行煉苗。
（4）不同轉基因玉米株系中X蛋白表達量差異性可能與 目的基因在染色體上的插入次數/目的基因在染色體上的插入位置/強啟動子是否丟失/受體RNA聚合酶表達量差異/目的基因是否導入受體細胞目的基因在染色體上的插入次數/目的基因在染色體上的插入位置/強啟動子是否丟失/受體RNA聚合酶表達量差異/目的基因是否導入受體細胞有關。（答出兩點即可）
【考點】植物的組織培養(yǎng)．
【答案】BamHⅠ和SacⅠ；T-DNA可以將強啟動子和X基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上；成功導入超量表達X基因載體；在培養(yǎng)基中添加潮霉素/以X基因為模板設計探針與X基因mRNA雜交/以X蛋白為抗體，獲得特異性抗原探針，以愈傷組織表達的X蛋白雜交；芽和根的分生組織（叢狀苗或幼苗）；這兩個過程所需的營養(yǎng)物質和植物生長調節(jié)劑配比不同；降低環(huán)境濕度；目的基因在染色體上的插入次數/目的基因在染色體上的插入位置/強啟動子是否丟失/受體RNA聚合酶表達量差異/目的基因是否導入受體細胞
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：1難度：0.7
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