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菁優(yōu)網(wǎng)基因工程可以賦予生物新的性狀,科研人員利用基因工程技術以期待獲得具備抗旱特性的小麥。請回答下列問題:
(1)研究發(fā)現(xiàn),某些植物的種子脫水數(shù)十年后復水仍能夠恢復活性,原因是細胞中積累海藻糖。科研人員擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉(zhuǎn)入小麥中。圖標注了載體TPS基因的酶切位點和預期的基因表達載體的結構,表格列舉了限制酶的識別序列。

識別序列
BamHⅠ 5′GGATCC3′
SacⅠ 5′GAGCTC3′
HindⅢ 5′AAGCTT3′
XbaⅠ 5′TCTAGA3′
①科研人員利用PCR技術獲得大量的TPS基因。現(xiàn)將②種引物的一側添加限制酶識別序列,這樣TPS基因的PCR產(chǎn)物和載體用相同的限制酶切割后,可利用
DNA連接
DNA連接
酶將TPS基因拼接到載體的切口處,形成基因表達載體。
②從圖分析,在TPS基因兩側引入的是
BamHI、SacI
BamHI、SacI
限制酶的酶切位點。設計的引物序列為
5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT
5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT

(2)圖中Bar基因是抗除草劑基因?;虮磉_載體轉(zhuǎn)入細胞后,在獲得的植株葉片上涂抹除草劑,篩選出7株抗除草劑個體。Bar基因作為載體上的
標記
標記
基因輔助篩選TPS轉(zhuǎn)基因植株。
(3)現(xiàn)對篩選出的抗除草劑個體進行DNA水平的檢測。請?zhí)顚懕砀?,完成實驗設計:
組別 植株編號1-7 對照組1 對照組2
模板
(提取的)1-7號植株DNA
(提取的)1-7號植株DNA
基因表達載體或TPS基因片段
空質(zhì)粒載體
空質(zhì)粒載體
PCR體系中其他物質(zhì) 擴增緩沖液、水、引物、③
4種脫氧核苷酸(或dNTP)
4種脫氧核苷酸(或dNTP)
、④
Taq酶
Taq酶
電泳預期結果
有條帶
有條帶
有條帶 沒有條帶
(4)圖為用探針檢驗某一轉(zhuǎn)海藻糖合成酶基因抗旱植物基因型的原理,相關基因用R和r表示。若被檢植株發(fā)生A現(xiàn)象,不發(fā)生B、C現(xiàn)象;則被檢植物的基因型為
RR
RR
。
菁優(yōu)網(wǎng)

【答案】DNA連接;BamHI、SacI;5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT;標記;(提取的)1-7號植株DNA;空質(zhì)粒載體;4種脫氧核苷酸(或dNTP);Taq酶;有條帶;RR
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/9 8:0:9組卷:73引用:8難度:0.6
相似題
  • 1.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)在進行基因工程操作時,先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
     
    。
    (2)若要使目的基因在受體細胞中表達,需要構建基因表達載體,其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外,還包括
     
    、
     
     
    ,其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關。
    (3)當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     

    (4)如何從個體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力?
     
    。
    (5)若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株,但植株抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
  • 2.已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-,根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是(  )
    菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/10/31 13:0:2組卷:46引用:2難度:0.7
  • 3.下列關于質(zhì)粒的說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/1 15:30:1組卷:23引用:2難度:0.7
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