玉米是重要的糧食作物,其葉片細胞中的P蛋白是一種水通道蛋白,由P基因編碼,在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調節(jié)功能。科研人員成功培育出超量表達P蛋白的轉基因玉米,回答下列問題。
(1)利用PCR技術以圖1中的DNA片段為模板擴增P基因,需要的引物有 BCBC(從A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇)。
(2)培育超量表達P蛋白的轉基因玉米過程中所用DNA片段和T頂質粒的酶切位點如圖2所示(Ti質粒上的T-DNA可轉移到被侵染的細胞,并整合到該細胞的染色體DNA上)。為使P基因在玉米植株中超量表達,應優(yōu)先選用 BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ?酶組合,理由是 能將P基因和強啟動子完整切割,且在與Ti質粒連接的過程中可避免自身環(huán)化等問題能將P基因和強啟動子完整切割,且在與Ti質粒連接的過程中可避免自身環(huán)化等問題;不選用圖中其它限制酶的原因是 EcoRⅠ和NotⅠ會破壞P基因,HindⅢ會將強啟動子和P基因分離EcoRⅠ和NotⅠ會破壞P基因,HindⅢ會將強啟動子和P基因分離。
(3)將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進行植物組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中需加入 潮霉素潮霉素?(填潮霉素/卡那霉素/潮霉素或卡那霉素)進行篩選。
?(4)P蛋白在玉米株系的表達量如圖3所示,可作為超量表達p蛋白轉基因玉米的生理特性研究實驗材料的有 a1 a2 a3a1 a2 a3?。
【答案】BC;BamHⅠ和SacⅠ;能將P基因和強啟動子完整切割,且在與Ti質粒連接的過程中可避免自身環(huán)化等問題;EcoRⅠ和NotⅠ會破壞P基因,HindⅢ會將強啟動子和P基因分離;潮霉素;a1 a2 a3
【解答】
【點評】
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