番茄紅素是類胡蘿卜素的一種，存在于番茄、西瓜等水果及一些蔬菜中，是目前自然界中存在的抗氧化、抗衰老和預(yù)防腫瘤能力最強(qiáng)的物質(zhì)之一，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)合成番茄紅素的功能基因是CrtE、CrtB與Crtl。為解決植物提取法產(chǎn)量低的問題，研究人員試通過基因工程技術(shù)來獲得大量的番茄紅素。請(qǐng)回答下列問題：
（1）為提高轉(zhuǎn)化效率，研究者根據(jù)CrtE、CrtB與Crtl基因序列及其蛋白產(chǎn)物等，將三個(gè)基因優(yōu)化設(shè)計(jì)為CrtEBI基因，并通過 化學(xué)（人工）化學(xué)（人工）法獲得了該基因。為了使目的基因能與表達(dá)載體正確連接，需在目的基因的兩端加上 合成兩種不同限制酶識(shí)別序列合成兩種不同限制酶識(shí)別序列。
（2）利用 （兩種不同）限制酶與DNA連接酶（兩種不同）限制酶與DNA連接酶酶將含有CrtEBI基因的DNA片段與質(zhì)粒pTRC99a相連。使用CaCl2處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于一種 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，進(jìn)而將重組表達(dá)載體倒入其中。
（3）待培養(yǎng)12h后，挑取單菌落進(jìn)行PCR驗(yàn)證以確定受體細(xì)胞是否被成功導(dǎo)入目的基因。若擴(kuò)增后的DNA樣品電泳結(jié)果如圖1，則圖2（深色部分為目的基因區(qū)段）中對(duì)應(yīng)泳道1和泳道2的引物組合分別為 3、43、4和 1、21、2。（填序號(hào)）
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】化學(xué)（人工）；合成兩種不同限制酶識(shí)別序列；（兩種不同）限制酶與DNA連接酶；能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；3、4；1、2
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：1引用：1難度：0.5
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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