科學家利用逆轉錄病毒將Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4四個細胞中的轉錄因子基因轉入小鼠成纖維細胞中,然后在培養(yǎng)ES細胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)這些細胞。2-3周后,這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài),具有活躍的分裂、分化能力各方面都與ES細胞相似,它們就是iPS細胞?;卮鹣铝袉栴}:
(1)Klf4的化學本質是
DNA
DNA
。如要在體外對Klf4進行擴增需要使用PCR技術,在其體外擴增的過程中需要在擴增體系中加入的 耐高溫的DNA聚合
耐高溫的DNA聚合
酶。若要鑒定PCR產物是否是Klf4,可以采取 瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
技術鑒定。
(2)將Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4轉入小鼠成纖維細胞中時逆轉錄病毒起到 載體
載體
的作用。與成體干細胞相比,iPS細胞不具有 組織特異性
組織特異性
,具有分化成各種組織或細胞的潛能。
(3)若將胰島損傷的糖尿病病人的皮膚成纖維細胞誘導成iPS細胞,再將它轉化成胰島B細胞,將這些胰島B細胞移植到病人體內,否
否
(填“是”/“否”)會引起免疫排斥反應。分析原因 誘導過程中細胞中的遺傳物質沒有發(fā)生變化,理論上產生的還是“自體”細胞 (誘導過程中細胞中的遺傳物質沒有發(fā)生變化,細胞抗原性特相同/誘導過程中細胞中的遺傳物質沒有發(fā)生變化,細胞HLA相同)
誘導過程中細胞中的遺傳物質沒有發(fā)生變化,理論上產生的還是“自體”細胞 (誘導過程中細胞中的遺傳物質沒有發(fā)生變化,細胞抗原性特相同/誘導過程中細胞中的遺傳物質沒有發(fā)生變化,細胞HLA相同)
。
(4)實驗證明iPS細胞的產生不是由培養(yǎng)基的作用造成的,為驗證該結論設計了對照實驗,請寫出該實驗的實驗思路 將轉入外源基因和沒轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,并確保其他培養(yǎng)條件相同,觀察兩組轉化成iPS細胞的情況
將轉入外源基因和沒轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,并確保其他培養(yǎng)條件相同,觀察兩組轉化成iPS細胞的情況
。如果要了解Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4在誘導iPS細胞產生時,每個基因作用的相對大小,需要設計 5
5
組實驗。