科學(xué)家利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4四個(gè)細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子基因轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中,然后在培養(yǎng)ES細(xì)胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)這些細(xì)胞。2-3周后,這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài),具有活躍的分裂、分化能力各方面都與ES細(xì)胞相似,它們就是iPS細(xì)胞。回答下列問題:
(1)Klf4的化學(xué)本質(zhì)是 DNADNA。如要在體外對Klf4進(jìn)行擴(kuò)增需要使用PCR技術(shù),在其體外擴(kuò)增的過程中需要在擴(kuò)增體系中加入的 耐高溫的DNA聚合耐高溫的DNA聚合酶。若要鑒定PCR產(chǎn)物是否是Klf4,可以采取 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)鑒定。
(2)將Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中時(shí)逆轉(zhuǎn)錄病毒起到 載體載體的作用。與成體干細(xì)胞相比,iPS細(xì)胞不具有 組織特異性組織特異性,具有分化成各種組織或細(xì)胞的潛能。
(3)若將胰島損傷的糖尿病病人的皮膚成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞,再將它轉(zhuǎn)化成胰島B細(xì)胞,將這些胰島B細(xì)胞移植到病人體內(nèi),否否(填“是”/“否”)會引起免疫排斥反應(yīng)。分析原因 誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,理論上產(chǎn)生的還是“自體”細(xì)胞 (誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,細(xì)胞抗原性特相同/誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,細(xì)胞HLA相同)誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,理論上產(chǎn)生的還是“自體”細(xì)胞 (誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,細(xì)胞抗原性特相同/誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,細(xì)胞HLA相同)。
(4)實(shí)驗(yàn)證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由培養(yǎng)基的作用造成的,為驗(yàn)證該結(jié)論設(shè)計(jì)了對照實(shí)驗(yàn),請寫出該實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)思路 將轉(zhuǎn)入外源基因和沒轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,并確保其他培養(yǎng)條件相同,觀察兩組轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞的情況將轉(zhuǎn)入外源基因和沒轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,并確保其他培養(yǎng)條件相同,觀察兩組轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞的情況。如果要了解Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4在誘導(dǎo)iPS細(xì)胞產(chǎn)生時(shí),每個(gè)基因作用的相對大小,需要設(shè)計(jì) 55組實(shí)驗(yàn)。
【考點(diǎn)】干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】DNA;耐高溫的DNA聚合;瓊脂糖凝膠電泳;載體;組織特異性;否;誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,理論上產(chǎn)生的還是“自體”細(xì)胞 (誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,細(xì)胞抗原性特相同/誘導(dǎo)過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,細(xì)胞HLA相同);將轉(zhuǎn)入外源基因和沒轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,并確保其他培養(yǎng)條件相同,觀察兩組轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞的情況;5
【解答】
【點(diǎn)評】
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