某動物體內含有研究者感興趣的目的基因，研究者欲將該基因導入大腸桿菌的質粒中保存。該質粒含有氨芐青霉素抗性基因（AmpR基因）、LacZ基因及一些酶切位點，其結構和簡單的操作步驟如圖所示。請根據以上信息回答下列問題。
（1）在第②步中，應選擇用 相同相同（相同/不同）的限制酶或切割能產生相同末端的限制酶切割質粒和含有目的基因的DNA片段。限制酶的切割位點 不能不能（能/不能）位于目的基因的內部，限制酶 不能不能（能/不能）破壞質粒的啟動子、終止子、標記基因、復制原點等結構。
（2）在第③步中，為了使質粒DNA與目的基因能連接，還需要在混合物中加入 DNA連接酶DNA連接酶（限制酶/DNA連接酶）。
（3）選用含有AmpR基因和LacZ基因的質粒的原因：AmpR基因AmpR基因（AmpR基因/LacZ基因）可用于檢測質粒是否導入了大腸桿菌。由于LacZ基因的效應，這些生長的菌落可能出現(xiàn)兩種顏色：含有空質粒（沒有連接目的基因的質粒）的大腸桿菌菌落呈 藍色藍色（藍色/白色）；含有重組質粒的大腸桿菌菌落呈 白色白色（藍色/白色）。
（4）含有重組質粒的大腸桿菌菌落呈白色的原因：目的基因的插入破壞了 LacZ基因的結構，使其不能正常表達形成 β-半乳糖苷酶β-半乳糖苷酶，底物 X-gal也就不會被分解。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】相同；不能；不能；DNA連接酶；AmpR基因；藍色；白色；β-半乳糖苷酶
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：6引用：1難度：0.5
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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