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酵母菌絮凝是指菌體細胞間通過細胞壁相互粘附、聚集成團的現(xiàn)象。適當提高酵母的絮凝能力,有助于發(fā)酵后細胞和產(chǎn)物的分離,節(jié)約生產(chǎn)成本??蒲腥藛T為研究R基因?qū)湍妇跄阅艿挠绊?,用基因工程技術獲得了R基因被敲除的酵母菌菌株,主要步驟如圖1(G418為一種氨基糖苷類抗生素)。據(jù)圖回答:
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(1)過程①,引物2和引物4分別添加了MluⅠ的識別序列,則引物1和引物3的5'端分別添加
BamHⅠ、HindⅢ
BamHⅠ、HindⅢ
的識別序列,PCR獲取R基因左右兩端的N和C片段過程中,除圖中條件外,還需提供
dNTP、Taq酶、緩沖液、Mg2+
dNTP、Taq酶、緩沖液、Mg2+
等條件(至少寫三個)。
(2)利用含
G418
G418
的培養(yǎng)基篩選出重組酵母,再挑取單菌落進行PCR擴增,驗證酵母細胞R基因是否被敲除,則擴增時選擇引物組合是
引物1和引物3
引物1和引物3
。
(3)科研人員繼續(xù)將野生酵母菌和R基因敲除酵母菌的菌液接種到裝有麥芽汁的錐形瓶中,一定條件下靜置發(fā)酵7天,測定酒精發(fā)酵能力和絮凝能力,結(jié)果如下表。
指標種類 酒精發(fā)酵能力 絮凝能力
野生酵母菌 4.5% 63.1%
R基因敲除酵母菌 4.5% 83.1%
①酒精發(fā)酵期間,每個錐形瓶應注意保持
密封
密封
條件和定期排氣。
②實驗結(jié)果表明,R基因敲除酵母菌是否符合生產(chǎn)需求?請說出你的判斷依據(jù)。
符合,R基因敲除后酵母菌的發(fā)酵能力不變,而絮凝能力增強
符合,R基因敲除后酵母菌的發(fā)酵能力不變,而絮凝能力增強

(4)科研人員又將不同濃度梯度的R基因敲除酵母菌菌液和野生酵母菌菌液點樣于含30g/mL鈣熒光白(細胞壁抑制劑,破壞細胞壁的正常組裝)的YPD培養(yǎng)基上,結(jié)果如圖2。推測R基因敲除酵母菌絮凝能力變化的原因是
R基因缺失增強了酵母菌對細胞壁抑制劑的耐性,絮凝能力增強
R基因缺失增強了酵母菌對細胞壁抑制劑的耐性,絮凝能力增強
。

【答案】BamHⅠ、HindⅢ;dNTP、Taq酶、緩沖液、Mg2+;G418;引物1和引物3;密封;符合,R基因敲除后酵母菌的發(fā)酵能力不變,而絮凝能力增強;R基因缺失增強了酵母菌對細胞壁抑制劑的耐性,絮凝能力增強
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/2 8:0:9組卷:4引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     

    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關基因工程的敘述,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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