某科研團隊利用小鼠篩選獲得一種針對禽流感病毒的鼠源單克隆抗體13D4。為了降低其應用于人體治療時可能產(chǎn)生的免疫排斥反應，將其改造為人-鼠嵌合抗體13D4-cAb,之后將構建好的真核表達載體導入中國倉鼠卵巢細胞（CHO 細胞）后，篩選能夠穩(wěn)定表達的細胞株，通過轉瓶培養(yǎng)、表達，純化后獲得大量嵌合抗體用于研究。請根據(jù)資料回答下列問題：
（1）研究人員從分泌13D4單克隆抗體的 雜交瘤雜交瘤細胞中提取總RNA或mRNA，經(jīng)處理得到輕、重鏈抗原結合區(qū)的cDNA用于 PCR擴增，并分別與人抗體輕、重鏈生物反應區(qū)DNA序列拼接，構建人-鼠嵌合抗體13D4-cAb的真核表達載體用于表達。
（2）將重組質(zhì)粒導入CHO細胞后，可采用 分子雜交分子雜交技術檢驗輕、重鏈基因是否成功轉錄，最后還需要通過 抗原--抗體雜交抗原--抗體雜交技術檢驗目的基因是否成功表達并組裝出有生物學活性的嵌合抗體。
（3）應用轉瓶培養(yǎng)篩選獲得的細胞，需將轉瓶放入CO2培養(yǎng)箱，以維持37℃和5% CO2等培養(yǎng)條件，合成培養(yǎng)基中通常還需加入 血清血清或血漿等一些天然成分。為避免出現(xiàn)細胞的 接觸抑制接觸抑制現(xiàn)象，當細胞鋪滿轉瓶內(nèi)壁約80%左右時，應當使用 胰蛋白酶胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
（4）PCR反應體系中，若一個模板DNA消耗引物分子14個，則該DNA擴增了 33輪。
（5）上述嵌合抗體的生產(chǎn)體現(xiàn)了 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程技術的應用。
【答案】雜交瘤；分子雜交；抗原--抗體雜交；血清；接觸抑制；胰蛋白酶；3；蛋白質(zhì)
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：54引用：2難度：0.7
相似題
-
1．動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細胞工程的基本技術，下列關于這兩項技術的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動物克隆和胚胎工程有關的問題：
（1）幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。在進行基因工程操作時，可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動物成纖維細胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以支持生長等措施。當?shù)谝粋€卡氏瓶中的細胞濃度不再增加時，若要細胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關于胚胎工程的敘述，錯誤的是
A．在動物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
B．若在囊胚期進行胚胎分割，內(nèi)細胞團均等分割，滋養(yǎng)成則不必
C．可以從雌性動物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細胞進一步培養(yǎng)成熟
D．胚胎成纖維細胞可以用于胚胎干細胞的培養(yǎng)，因為其能分泌抑制細胞分化的物質(zhì)。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7 -
3．據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù)，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請回答下列問題：
（1）從患者體內(nèi)獲得體細胞后，對其進行的初次培養(yǎng)稱為，培養(yǎng)的細胞在貼壁生長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂，這種現(xiàn)象稱為。一般來說，動物細胞培養(yǎng)需要的條件有（少答出兩點）。
（2）利用PCR技術擴增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對進行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測胰島類似細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能，可設計如下實驗：將等量的胰島類似細胞與正常胰島B細胞分別加入兩組相等濃度的培養(yǎng)液中，適宜且相同條件下進行培養(yǎng)，一段時間后分別檢測兩組培養(yǎng)液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優(yōu)點是。發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~