Ⅰ.鹽分是限制植物生長發(fā)育的重要因素之一,科研人員嘗試?yán)免┮号菽a+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因(AINHX基因)培育轉(zhuǎn)基因耐鹽馬鈴薯。
(1)通常從獐茅的
基因文庫
基因文庫
中獲取AINHX基因用以構(gòu)建基因表達(dá)載體,構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中必須使用的工具酶是 限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。
(2)為探究目的基因整合到馬鈴薯基因組后是否轉(zhuǎn)錄,可從轉(zhuǎn)基因植株的細(xì)胞中提取所有mRNA并反轉(zhuǎn)錄成 cDNA
cDNA
,再利用PCR方法進行基因擴增。若以根細(xì)胞為材料擴增結(jié)果為陽性(有產(chǎn)物生成),以葉細(xì)胞為材料擴增結(jié)果為陰性(無產(chǎn)物生成),則說明 目的基因在根細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄,未在葉細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄
目的基因在根細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄,未在葉細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄
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(3)為證明轉(zhuǎn)基因馬鈴薯獲得了耐鹽性,將 生長至4葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度NaCl的培養(yǎng)液中或大田中培養(yǎng),一段時間后觀察植株生長情況
生長至4葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度NaCl的培養(yǎng)液中或大田中培養(yǎng),一段時間后觀察植株生長情況
。
Ⅱ.馬鈴薯是種植廣泛的農(nóng)作物,病毒侵染后導(dǎo)致產(chǎn)量大幅下降,培育脫毒和抗毒的馬鈴薯品種是提高產(chǎn)量的有效方法。請分析并回答問題:
(4)馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒,因此可將馬鈴薯莖尖接種在培養(yǎng)基中,經(jīng)過人工培養(yǎng)獲得脫毒苗。為監(jiān)控脫毒苗的質(zhì)量,可采用 抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
的方法檢測病毒的蛋白質(zhì)。
(5)研究人員研究了莖尖外植體大小對苗的成苗率和脫毒率的影響,實驗結(jié)果如上圖所示。該結(jié)果表明,在一定范圍內(nèi),莖尖越小,成苗率越低,脫毒率越高
成苗率越低,脫毒率越高
,因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為 0.27mm
0.27mm
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