科研人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將抗TMV基因(一種抗煙草花葉病毒的基因)轉(zhuǎn)入到煙草細(xì)胞中,從而培育出抗TMV的煙草,主要流程如圖所示。請回答下列問題。
(1)科研人員通過逆轉(zhuǎn)錄的方法人工合成目的基因,并利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,在PCR反應(yīng)體系中除了含有緩沖溶液、目的基因、原料之外,還應(yīng)含有 引物和耐高溫的DNA聚合酶引物和耐高溫的DNA聚合酶。
(2)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時需要使用DNA連接酶DNA連接酶將目的基因和Ti質(zhì)粒進(jìn)行拼接,這類酶的作用是恢復(fù)被同種限制酶切開的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。重組Ti質(zhì)粒中包含啟動子、終止子及抗生素抗性基因等,其中啟動子是 RNA聚合酶識別和結(jié)合RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,從而驅(qū)動目的基因的轉(zhuǎn)錄。
(3)構(gòu)建成功的重組Ti質(zhì)粒常用 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入到煙草細(xì)胞中。將煙草細(xì)胞培養(yǎng)在含卡那霉素的培養(yǎng)基中的目的是 篩選含有目的基因的煙草細(xì)胞篩選含有目的基因的煙草細(xì)胞,從而培育出抗TMV的煙草植株。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】引物和耐高溫的DNA聚合酶;DNA連接酶;磷酸二酯鍵;RNA聚合酶識別和結(jié)合;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化;篩選含有目的基因的煙草細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:1引用:1難度:0.6
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