科學家從某細菌中提取抗鹽基因,轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草。如圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程,含目的基因的DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請分析回答下列問題:
(1)在該過程中,研究人員首先獲取了抗鹽基因(目的基因),并采用PCRPCR技術(shù)對目的基因進行擴增,該技術(shù)擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物,同時該技術(shù)必須用Taq(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)Taq(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)酶;然后構(gòu)建基因表達載體,其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。
(2)用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。
(3)圖中⑤、⑥依次表示植物組織培養(yǎng)過程中抗鹽煙草細胞的脫分化脫分化、再分化再分化過程。
(4)為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功,既要進行分子雜交檢測,又要在個體水平上鑒定,后者具體過程是將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中,觀察該煙草植株的生長狀態(tài)將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中,觀察該煙草植株的生長狀態(tài)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】PCR;要有一段已知目的基因的核苷酸序列;Taq(熱穩(wěn)定DNA聚合酶);使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用;SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因;脫分化;再分化;將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中,觀察該煙草植株的生長狀態(tài)
【解答】
【點評】
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