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玉米是重要的糧食類作物,其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白,由P基因編碼,在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中對(duì)水分的吸收具有重要的功能。科研人員成功培育出超量表達(dá)的P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米,所用的DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示:

(1)強(qiáng)啟動(dòng)子是一段特殊的DNA片段,能被
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別并結(jié)合,驅(qū)動(dòng)基因持續(xù)轉(zhuǎn)錄。如果將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米的某個(gè)基因的內(nèi)部,則會(huì)獲得該基因的
沉默
沉默
(選填“超量表達(dá)”或“沉默”)突變體。
(2)為使得P基因在玉米植株中超量表達(dá),應(yīng)選用
BamHⅠ、SacⅠ
BamHⅠ、SacⅠ
酶組合酶切DNA片段和Ti質(zhì)粒,構(gòu)建基因表達(dá)載體。T-DNA在該過程中的具體作用是
攜帶強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因拼接到玉米細(xì)胞的染色體DNA上
攜帶強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因拼接到玉米細(xì)胞的染色體DNA上
。
(3)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng),為最終獲得目標(biāo)植株,培養(yǎng)基中應(yīng)加入
G418抗生素
G418抗生素
進(jìn)行篩選,該物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素,它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成,使植物的光合作用和
呼吸作用
呼吸作用
受到干擾,從而引起細(xì)胞死亡。
(4)玉米在世界谷物生產(chǎn)特別是飼料生產(chǎn)中占有重要地位。為實(shí)現(xiàn)玉米資源的高效利用,研究人員采用α-淀粉酶處理玉米來提取β-葡聚糖,欲探究提取β-葡聚糖的最適條件,測(cè)定了在不同條件下的β-葡聚糖的提取率?;卮鹣铝袉栴}:
①酶的作用機(jī)理是
顯著降低反應(yīng)的活化能
顯著降低反應(yīng)的活化能
。
②據(jù)圖分析,水溶加熱時(shí)間在1-5h內(nèi),β-葡聚糖提取率的變化為
先增加后減少
先增加后減少
,溫度影響β-葡聚糖提取率的原因最可能是
溫度影響了酶的活性,從而影響酶促反應(yīng)速率
溫度影響了酶的活性,從而影響酶促反應(yīng)速率

③綜合分析,若采用耐熱α-淀粉酶提取β-葡聚糖,所需的最優(yōu)化條件組合為
料液比為1:10、水溶溫度75℃、水溶加熱時(shí)間4小時(shí)、淀粉酶添加量為1.5%
料液比為1:10、水溶溫度75℃、水溶加熱時(shí)間4小時(shí)、淀粉酶添加量為1.5%
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】RNA聚合酶;沉默;BamHⅠ、SacⅠ;攜帶強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因拼接到玉米細(xì)胞的染色體DNA上;G418抗生素;呼吸作用;顯著降低反應(yīng)的活化能;先增加后減少;溫度影響了酶的活性,從而影響酶促反應(yīng)速率;料液比為1:10、水溶溫度75℃、水溶加熱時(shí)間4小時(shí)、淀粉酶添加量為1.5%
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/18 8:0:9組卷:2引用:2難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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