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淀粉是食物的重要成分,也是一種重要的工業(yè)原料,其水解產物廣泛用于糖類及酒精發(fā)酵等行業(yè)。目前,工廠化水解淀粉需在高溫條件下進行,因此開發(fā)具有自主產權的耐熱性α-淀粉酶并實現(xiàn)大規(guī)模生產,對我國淀粉深加工產業(yè)的發(fā)展具有重要意義。為了實現(xiàn)α-淀粉酶的高效表達和分泌,我國科研人員以芽孢桿菌構建工程菌開展研究。
回答下列問題:
(1)科研人員從某熱泉的細菌中發(fā)現(xiàn)一種α-淀粉酶(AmyS1),利用蛋白質工程對其進行改造,獲得了具有更高熱穩(wěn)定性和催化效率的重組耐高溫α-淀粉酶(AmyS2)。其基本操作流程是
⑤⑥③②⑧
⑤⑥③②⑧
(從下列操作或思路中,選擇正確的序號并排序)
①人工合成AmyS1基因
②人工合成AmyS2基因
③分子設計目標蛋白的氨基酸序列
④預期AmyS1功能
⑤預期AmyS2功能
⑥設計目標蛋白的三維結構
⑦將獲得的基因導入受體細胞生產AmyS1
⑧將獲得的基因導入受體細胞生產AmyS2
(2)獲取AmyS2基因后,構建基因表達載體的過程如圖1所示。該過程中,將目的基因與原始質粒A構建成質粒B,應選擇的限制酶是
NdeⅠ和EcoRⅠ
NdeⅠ和EcoRⅠ
;將質粒B與信號肽基因構建成質粒C,應選擇的限制酶是
MluⅠ和Eco52Ⅰ
MluⅠ和Eco52Ⅰ


(3)信號肽是一段能夠引導目標蛋白質分泌到細胞外的肽鏈。據(jù)此推測,與質粒B相比,在工業(yè)生產中使用導入質粒C的工程菌生產α-淀粉酶的優(yōu)勢是
芽孢桿菌可以將α-淀粉酶分泌到細胞外,便于從培養(yǎng)液中提取產物
芽孢桿菌可以將α-淀粉酶分泌到細胞外,便于從培養(yǎng)液中提取產物
。
(4)研究發(fā)現(xiàn),芽孢桿菌會分泌一種胞外蛋白酶(控制其合成的基因是bcp),導致胞外α-淀粉酶被降解。請從改造工程菌的角度提出一條解決該問題的思路
用敲除了bcp基因(或抑制bcp基因的表達)的芽孢桿菌作為工程菌生產AmyS2
用敲除了bcp基因(或抑制bcp基因的表達)的芽孢桿菌作為工程菌生產AmyS2

(5)檢測獲得的α-淀粉酶的特性,結果如圖所示。在工廠化生產中,利用該酶水解淀粉時,應設置的溫度是
90(或“90~100”)
90(或“90~100”)
℃,理由是
α-淀粉酶在90℃(或“90~100℃”)時相對酶活性和熱穩(wěn)定性均較高
α-淀粉酶在90℃(或“90~100℃”)時相對酶活性和熱穩(wěn)定性均較高
。

【答案】⑤⑥③②⑧;NdeⅠ和EcoRⅠ;MluⅠ和Eco52Ⅰ;芽孢桿菌可以將α-淀粉酶分泌到細胞外,便于從培養(yǎng)液中提取產物;用敲除了bcp基因(或抑制bcp基因的表達)的芽孢桿菌作為工程菌生產AmyS2;90(或“90~100”);α-淀粉酶在90℃(或“90~100℃”)時相對酶活性和熱穩(wěn)定性均較高
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:21引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內,可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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