對土壤中分解纖維素的微生物的研究與應(yīng)用,使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精,用纖維素酶處理服裝面料等。為了尋求高效降解纖維素的微生物,某科研團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了纖維素優(yōu)勢分解菌的篩選實(shí)驗(yàn)。主要步驟如下:
①制備培養(yǎng)基。
②纖維素分解菌的分離、純化。取富集培養(yǎng)后的土樣培養(yǎng)液,經(jīng)適當(dāng)稀釋后,移取培養(yǎng)液各0.1mL分別接種到能分別篩選出細(xì)菌、真菌和放線菌的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離、純化培養(yǎng)。
③纖維素分解菌的初篩。將已經(jīng)純化的菌株接種到同一個以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,使用剛果紅染色法,根據(jù)培養(yǎng)基平板上透明圈直徑(H)與菌落直徑(h)比值的大小,初步篩選出纖維素優(yōu)勢分解菌。
回答下列問題:
(1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時,獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是
防止外來雜菌的污染
防止外來雜菌的污染
。
(2)微生物的接種方法很多,最常用的是平板劃線法和 稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
。步驟甲和步驟乙是平板劃線操作中的兩個步驟,步驟甲的操作是將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅;步驟乙的操作是將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中,沾取一環(huán)菌液,從步驟甲至步驟乙的操作過程中,還需進(jìn)行的操作步驟是 在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開盛有菌液的試管的棉塞;將試管口通過火焰
在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開盛有菌液的試管的棉塞;將試管口通過火焰
。
(3)微生物吸收的無機(jī)鹽的作用是 維持細(xì)胞和生物體的生命活動;維持細(xì)胞的酸堿平衡(調(diào)節(jié)滲透壓;組成化合物)
維持細(xì)胞和生物體的生命活動;維持細(xì)胞的酸堿平衡(調(diào)節(jié)滲透壓;組成化合物)
。(答出二點(diǎn)即可)。
(4)步驟②③中,若將稀釋后且富含多種類型微生物的土樣培養(yǎng)液直接涂布于同一個以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,可能導(dǎo)致錯過優(yōu)勢纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn),原因是 不同種類型的微生物之間的生長會相互影響(或多種類型微生物直接接種在同一個以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,各種微生物之間產(chǎn)生競爭關(guān)系,生長相互影響,不利于優(yōu)勢纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn))
不同種類型的微生物之間的生長會相互影響(或多種類型微生物直接接種在同一個以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,各種微生物之間產(chǎn)生競爭關(guān)系,生長相互影響,不利于優(yōu)勢纖維素分解菌的發(fā)現(xiàn))
。
(5)接種在培養(yǎng)基上初篩分離得到的4個菌株的觀察結(jié)果如表。表中H/h的大小與纖維素酶的 量與活性
量與活性
有關(guān)。據(jù)表分析,降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是 3
3
(填表中菌株編號的序號)。
菌株編號 |
菌落直徑h(cm) |
透明圈直徑H(cm) |
H/h |
1 |
0.3 |
0.9 |
3.00 |
2 |
0.3 |
0.6 |
2.00 |
3 |
0.3 |
1.3 |
4.33 |
4 |
0.6 |
2.0 |
3.33 |