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幽門(mén)螺桿菌(Hp)是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌,該菌的Ipp20基因能合成其特有的蛋白質(zhì),據(jù)此,研究者利用基因工程制備Hp疫苗。已知Ipp20基因表達(dá)時(shí),雙鏈DNA的一條鏈?zhǔn)蔷幋a鏈,另一條鏈?zhǔn)悄0彐?,如圖1;四種限制酶及其識(shí)別序列如圖2;三種質(zhì)粒如圖3,箭頭表示限制酶的切割位點(diǎn);操作步驟如圖4?;卮鹣铝袉?wèn)題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)Ipp20基因終止子序列位于圖1中的
非編碼區(qū)2
非編碼區(qū)2
區(qū)段,該基因轉(zhuǎn)錄時(shí),編碼起始密碼子的序列位于圖1中的
編碼區(qū)
編碼區(qū)
區(qū)段。
(2)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA前8個(gè)堿基序列為
5′CUCGAGAU
5′CUCGAGAU
(方向?yàn)?′→3′)。若通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增Ipp20基因的編碼區(qū)段,則需要設(shè)計(jì)一對(duì)引物,其中結(jié)合到編碼鏈上的引物序列是
5′TCTAGAGG
5′TCTAGAGG
(方向?yàn)?′→3′,寫(xiě)出5′端8個(gè)堿基序列)。
(3)據(jù)圖1、2、3分析,構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)選用的限制酶是
XbaⅠ、XhoⅠ
XbaⅠ、XhoⅠ
,最適合用作載體的質(zhì)粒是
質(zhì)粒Z
質(zhì)粒Z
。
(4)圖4中為篩選出含有目的基因的大腸桿菌,通常采用影印法(使用無(wú)菌的線(xiàn)氈布?jí)涸谂囵B(yǎng)基A的菌落上,帶出少許菌種,平移并壓在培養(yǎng)基B上、結(jié)果如圖所示)。培養(yǎng)基A、B中應(yīng)分別添加
潮霉素、氯霉素
潮霉素、氯霉素
,符合實(shí)驗(yàn)要求的菌落是
3、5
3、5
(填寫(xiě)數(shù)字),判斷依據(jù)是
菌落3、5在含潮霉素培養(yǎng)基中能生長(zhǎng),但在含氯霉素培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng),說(shuō)明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質(zhì)粒
菌落3、5在含潮霉素培養(yǎng)基中能生長(zhǎng),但在含氯霉素培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng),說(shuō)明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質(zhì)粒
。

【答案】非編碼區(qū)2;編碼區(qū);5′CUCGAGAU;5′TCTAGAGG;XbaⅠ、XhoⅠ;質(zhì)粒Z;潮霉素、氯霉素;3、5;菌落3、5在含潮霉素培養(yǎng)基中能生長(zhǎng),但在含氯霉素培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng),說(shuō)明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質(zhì)粒
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:27引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.番茄含有豐富的維生素,但不耐寒??茖W(xué)家將魚(yú)的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞,并進(jìn)行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株,并將該植株種植在寒冷環(huán)境中,發(fā)現(xiàn)番茄植株并無(wú)抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因,科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下分析。回答下列問(wèn)題:
    (1)提取細(xì)胞中的
     
    ,采用抗原―抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),若能檢測(cè)到抗凍蛋白,但含量非常少,其原因可能是
     
    。魚(yú)的抗凍蛋白基因能在番茄細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的理論基礎(chǔ)是
     
    。
    (2)若經(jīng)上一步檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白,可采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是
     
    ,檢測(cè)過(guò)程中需使用DNA探針進(jìn)行檢測(cè),若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶,說(shuō)明
     
    ,則可能是
     
    導(dǎo)致無(wú)抗凍蛋白。
    (3)若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白的mRNA,使用DNA探針對(duì)細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA進(jìn)行檢測(cè),若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶,說(shuō)明
     
    ,則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無(wú)法正常表達(dá)。若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白基因,說(shuō)明在轉(zhuǎn)化過(guò)程中,可能導(dǎo)入番茄細(xì)胞的是
     
    (填“普通質(zhì)粒”或“重組質(zhì)?!保?。

    發(fā)布:2024/11/8 11:0:1組卷:5引用:1難度:0.5
  • 2.運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法,將抗菜青蟲(chóng)的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中,培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)的油菜品種,這一品種在生長(zhǎng)過(guò)程中能產(chǎn)生特異的殺蟲(chóng)蛋白質(zhì),對(duì)菜青蟲(chóng)有顯著抗性,能大大減輕菜青蟲(chóng)對(duì)油菜的危害,提高油菜產(chǎn)量,減少農(nóng)藥使用,據(jù)以上信息,下列敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/7 11:0:1組卷:104引用:32難度:0.7
  • 3.CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞,一時(shí)間讓國(guó)內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱(chēng)是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法,CAR-T療法的操作步驟是:①直接采取患者的外周血,分離出其中的T淋巴細(xì)胞;②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造,裝載上具有識(shí)別腫瘤抗原的受體及其刺激分子,形成CAR-T細(xì)胞;③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng),大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加;④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi),從而識(shí)別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后,這些細(xì)胞一旦遇見(jiàn)表達(dá)對(duì)應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞,便會(huì)被激活并再擴(kuò)增,發(fā)揮其極大的特異殺傷力,殺死癌細(xì)胞?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞,需要對(duì)其進(jìn)行基因工程改造,以得到CAR-T細(xì)胞。
    ①基因工程最核心的步驟是
     

    ②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是
     
    。
    ③可以通過(guò)PCR技術(shù)獲得大量目的基因,利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為
     
    三步,其中第三步所使用的酶是
     
    。
    (2)體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí),不僅要確保
     
    的環(huán)境條件,還要定期更換培養(yǎng)液,這樣做的目的是
     
    。
    (3)結(jié)合題干信息分析,CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是
     
    (答出2點(diǎn)即可)。

    發(fā)布:2024/11/8 11:59:57組卷:3引用:2難度:0.5
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