抗菌肽具有熱穩(wěn)定性以及廣譜抗細菌等特點，其廣泛的生物學活性顯示了其在醫(yī)學上良好的應(yīng)用前景。科研工作者將若干編碼抗菌肽（ABP）序列按照首尾相連的方式插在質(zhì)粒PLG339的布康唑抗性基因內(nèi)部，形成長度為4800bp（1bp為一個堿基對）的重組質(zhì)粒PLG339-nABP，相關(guān)過程如圖所示。已知重組質(zhì)粒中，每個編碼ABP序列中都含有限制酶AccⅢ的一個切點，基因trpA的表達產(chǎn)物可使細胞利用無機氮源合成色氨酸（色氨酸是微生物生長必須的氨基酸）。請據(jù)圖1回答下列問題：
（1）若PLG339-nABP經(jīng)限制酶AccⅢ處理后，產(chǎn)生66 bp和4 140 bp兩種長度的DNA片段，則這些DNA片段共有1111個，單個抗菌肽（ABP）最多由2222個氨基酸構(gòu)成（不考慮終止密碼）。
（2）現(xiàn)有大腸桿菌和酵母菌兩種菌群，可作為導入PLG339-nABP的受體細胞的是酵母菌酵母菌，理由是抗菌肽具有殺滅細菌的作用（不能殺滅酵母菌）抗菌肽具有殺滅細菌的作用（不能殺滅酵母菌）。
（3）若選定的受體細胞為trpA基因缺陷型，則需采用兩步法篩選含重組質(zhì)粒的細胞。第一步篩選的固體培養(yǎng)基在營養(yǎng)成分上的要求是含無機氮源而不含色氨酸含無機氮源而不含色氨酸，第二步采用“影印法”，將第一步所得菌落轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基中應(yīng)添加布康唑布康唑。通過對照，最終選出能在第一步培養(yǎng)基上生長，而不能在第二步培養(yǎng)基上生長的菌落即為符合要求的成功導入重組質(zhì)粒的細胞。
（4）在測試轉(zhuǎn)基因表達產(chǎn)物ABP對金黃色葡萄球菌的殺菌效果時獲得了如圖2所示的結(jié)果，據(jù)此可獲得的結(jié)論是ABP抑菌效果與ABP的濃度濃度和金黃色葡萄球菌的不同培養(yǎng)時期/天數(shù)不同培養(yǎng)時期/天數(shù)有關(guān)。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】11；22；酵母菌；抗菌肽具有殺滅細菌的作用（不能殺滅酵母菌）；含無機氮源而不含色氨酸；布康唑；濃度；不同培養(yǎng)時期/天數(shù)
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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