2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予開發(fā)CRISPR基因組定向編輯技術(shù)的兩位科學(xué)家。CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)由gRNA和Cas9蛋白（能夠切割DNA的酶）組成。CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用原理如圖所示，請(qǐng)回答下列問題：
（1）將gRNA基因和Cas9編碼基因重組到質(zhì)粒并利用顯微注射顯微注射技術(shù)導(dǎo)入受精卵，在受精卵內(nèi)gRNA基因通過轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生gRNA，Cas9編碼基因通過轉(zhuǎn)錄和翻譯（表達(dá)）轉(zhuǎn)錄和翻譯（表達(dá)）產(chǎn)生Cas9蛋白。gRNA和Cas9蛋白共同構(gòu)成基因編輯系統(tǒng)，對(duì)靶向基因?qū)崿F(xiàn)定點(diǎn)編輯?？赏ㄟ^PCRPCR技術(shù)在體外獲得大量的Cas9編碼基因，該技術(shù)的原理是DNA（雙鏈）復(fù)制DNA（雙鏈）復(fù)制。
（2）據(jù)圖可知gRNA是一段能和靶向基因上特定序列互補(bǔ)能和靶向基因上特定序列互補(bǔ)的單鏈RNA，從而定向引導(dǎo)Cas9蛋白與靶向基因結(jié)合，并在特定位點(diǎn)切割DNA，該過程斷裂的是磷酸二酯磷酸二酯鍵。
（3）靶向基因中的PAM序列是gRNA的重點(diǎn)識(shí)別區(qū)域，以幫助Cas9蛋白實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因的切割和后續(xù)編輯。由于大多數(shù)基因中都含PAM序列大多數(shù)基因中都含PAM序列，因此CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能夠?qū)Υ蠖鄶?shù)基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯。
（4）某科研團(tuán)隊(duì)從轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌患者中分離出T細(xì)胞，使用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除細(xì)胞中的PD-1基因，在體外擴(kuò)增到一定量后再重新輸回患者體內(nèi)，達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的，這屬于體外體外基因治療。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】顯微注射；轉(zhuǎn)錄；轉(zhuǎn)錄和翻譯（表達(dá)）；PCR；DNA（雙鏈）復(fù)制；能和靶向基因上特定序列互補(bǔ)；磷酸二酯；大多數(shù)基因中都含PAM序列；體外
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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