胰島素對(duì)治療糖尿病有積極的作用，為了批量生產(chǎn)人胰島素，科學(xué)家提出了兩種通過基因工程改造大腸桿菌來生產(chǎn)人胰島素的方法。
一、AB法：根據(jù)胰島素A、B兩條肽鏈人工合成兩種DNA片段，利用大腸桿菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素；
二、BCA法：利用胰島B細(xì)胞中的mRNA得到胰島素基因，導(dǎo)入大腸桿菌獲得胰島素。這兩種方法使用同一種質(zhì)粒作為載體。如圖為過程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)，請(qǐng)回答下列問題。
（1）該項(xiàng)技術(shù)操作時(shí)不選用EcoRⅠ切割質(zhì)粒的原因是 EcoRl會(huì)同時(shí)破壞兩種標(biāo)記基因，無法實(shí)現(xiàn)對(duì)重組DNA分子的篩選EcoRl會(huì)同時(shí)破壞兩種標(biāo)記基因，無法實(shí)現(xiàn)對(duì)重組DNA分子的篩選。
（2）將人的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌，需要先構(gòu)建由啟動(dòng)子、目的基因、標(biāo)記基因、終止子等組成的重組質(zhì)粒，該過程為基因工程的核心，稱為 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建，其中啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNARNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。以上 AB和BCAAB和BCA（填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”）法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動(dòng)子。
（3）要使目的基因與載體正確連接，需在PCR引物上添加相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列。已知胰島素基因左端①處的堿基序列為5′-CCTTTCAGCTCA-3'，則其中一種引物設(shè)計(jì)的序列是 BB。
A．5′-CTCGAGGGAAAGTCGAGT-3'
B．5'-CTCGAGCCTTTCAGCTCA-3'
C．5'-CAATTGGGAAAGTCGAGT-3'
D．5′-CAATTGCCTTTCAGCTCA-3'
（4）β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。大腸桿菌經(jīng) 鈣離子鈣離子處理后，與重組質(zhì)粒混合培養(yǎng)一段時(shí)間，再接種到添加了 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上，篩選出 白色白色的菌落即為工程菌種。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】EcoRl會(huì)同時(shí)破壞兩種標(biāo)記基因，無法實(shí)現(xiàn)對(duì)重組DNA分子的篩選；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；AB和BCA；B；鈣離子；氨芐青霉素和X-gal；白色
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/4 8:0:9組卷：10引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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