當(dāng)前，臨床上常采用RT-PCR技術(shù)（以mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再進(jìn)行PCR擴增）對受試者的咽拭子取樣后進(jìn)行新型冠狀病毒核酸檢測。以下是某醫(yī)院發(fā)熱門診醫(yī)生采用該項技術(shù)對受試者進(jìn)行新型冠狀病毒核酸檢測的相關(guān)操作步驟：
①從受試者組織樣本中提取MRNA；
②分析PCR擴增結(jié)果；
③利用PCR護增cDNA片段；
④采集受試者組織樣本；
⑤用mRNA逆轉(zhuǎn)錄得到DNA。
回答下列問題：
（1）得到科學(xué)而準(zhǔn)確的檢測結(jié)果是進(jìn)行新型冠狀病毒核酸檢測的基本要求，上述符合RT-PCR技術(shù)的正確操作順序應(yīng)是 ④①⑤③②④①⑤③②（用數(shù)字序號表示）。
（2）RT-PCR操作過程中，所需的酶有 逆（反）轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）逆（反）轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）。在進(jìn)行RT-PCR擴增時，引物在復(fù)制過程中可與 模板鏈（cDNA）中相應(yīng)互補的堿基序列模板鏈（cDNA）中相應(yīng)互補的堿基序列結(jié)合，繼而產(chǎn)生相應(yīng)擴增酶的結(jié)合位點。
（3）RT-PCR的產(chǎn)物經(jīng)過BamHI、EcoRI雙限制酶處理以后，再與經(jīng)過同樣雙酶處理的小雙節(jié)病毒（PBV）載體連接，該操作屬于基因工程操作步驟中的 構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體，這也是基因工程的核心步驟。與單一限制酶處理相比，雙限制酶處理的優(yōu)點是 防止目的基因（載體）自身連接；防止目的基因與運載體反向連接防止目的基因（載體）自身連接；防止目的基因與運載體反向連接（答出2點即可）。
（4）利用RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因 能能（填“能”或“不能”）在物種間進(jìn)行交流，其原因是 RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因通常無內(nèi)含子等非編碼序列，利于基因交流（或生物界共用一套遺傳密碼子）RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因通常無內(nèi)含子等非編碼序列，利于基因交流（或生物界共用一套遺傳密碼子）。該技術(shù)還可用于對某些微量RNA病毒的檢測，可以有效提高檢測的靈敏度，其原因是 增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】④①⑤③②；逆（反）轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；模板鏈（cDNA）中相應(yīng)互補的堿基序列；構(gòu)建基因表達(dá)載體；防止目的基因（載體）自身連接；防止目的基因與運載體反向連接；能；RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因通常無內(nèi)含子等非編碼序列，利于基因交流（或生物界共用一套遺傳密碼子）；增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：2難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）。可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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