研究人員將大麥細(xì)胞的LTP1基因?qū)肫【平湍妇?，獲得的啤酒酵母菌可產(chǎn)生LTP1蛋白，并釀出泡沫豐富的啤酒，下圖為轉(zhuǎn)基因啤酒酵母的生產(chǎn)過(guò)程?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）已知DNA復(fù)制時(shí)子鏈的延伸方向是5′→3′，圖1中A、B、C、D在不同情況下可以作為引物，在PCR技術(shù)中，擴(kuò)增LTP1基因，必須要有 有一段已知目的基因的核苷酸序列有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。擴(kuò)增LTP1基因時(shí)應(yīng)該選用圖1中的 B和CB和C作為引物。
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實(shí)施基因工程的核心。圖2中的B為質(zhì)粒，質(zhì)粒和LTP1基因結(jié)合形成重組質(zhì)粒C。重組質(zhì)粒C在受體細(xì)胞中能夠穩(wěn)定存在并發(fā)揮作用，在LTP1基因的首端必須具有 啟動(dòng)子啟動(dòng)子，尾端必須具有終止子，還必須含有標(biāo)記基因和目的基因。
（3）為檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞基因組中的整合情況，首先采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)LTP1基因是否導(dǎo)入成功，需要從轉(zhuǎn)基因啤酒酵母中提取DNA，用 放射性同位素標(biāo)記的目的基因（LTPI基因）單鏈放射性同位素標(biāo)記的目的基因（LTPI基因）單鏈作探針與之雜交。還可分別用含有青霉素、四環(huán)素的兩種選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，則有圖2中C導(dǎo)入的酵母菌在選擇培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況是 在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活，但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活，但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活。
（4）為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因啤酒酵母是否產(chǎn)生LTP1蛋白，除檢測(cè)LTP1蛋白是否產(chǎn)生及含量外，還可觀察轉(zhuǎn)基因啤酒酵母所釀啤酒的 泡沫豐富程度泡沫豐富程度進(jìn)行判斷，若能檢測(cè)到LTP1蛋白，但效果差，可能的原因是 LTPI基因表達(dá)效率低，合成的LTPI蛋白少LTPI基因表達(dá)效率低，合成的LTPI蛋白少；若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)LTP1蛋白，可采用PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA，如果能檢測(cè)到mRNA，則可能是 （LTPI基因）未能正常翻譯（LTPI基因）未能正常翻譯；如果檢測(cè)后確定細(xì)胞中無(wú)LTP1蛋白的mRNA，但之前能檢測(cè)到LTP1基因，則LTP1基因未能正常轉(zhuǎn)錄的原因可能是 LTPI基因反向插入質(zhì)粒DNA分子中LTPI基因反向插入質(zhì)粒DNA分子中。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】有一段已知目的基因的核苷酸序列；B和C；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；啟動(dòng)子；放射性同位素標(biāo)記的目的基因（LTPI基因）單鏈；在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活，但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活；泡沫豐富程度；LTPI基因表達(dá)效率低，合成的LTPI蛋白少；（LTPI基因）未能正常翻譯；LTPI基因反向插入質(zhì)粒DNA分子中
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：14引用：2難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
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3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ?。?
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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