曲妥珠單抗是抗Her2的單克隆抗體,用于阻斷癌細(xì)胞的生長。如圖為制備單克隆抗體的過程?;卮鹨韵聠栴}:(1)給小鼠注射Her2蛋白進(jìn)行免疫,在35天獲取B淋巴細(xì)胞懸液進(jìn)行融合。在獲取B淋巴細(xì)胞前3天需再次注射Her2蛋白,這樣做的目的是
通過二次免疫使產(chǎn)生的抗Her2抗體的B淋巴細(xì)胞增多
通過二次免疫使產(chǎn)生的抗Her2抗體的B淋巴細(xì)胞增多
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(2)誘導(dǎo)融合獲得的細(xì)胞有未融合的親本細(xì)胞、融合的具有同種核的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞,原因是 細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%
細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%
。缺失HPRT基因的細(xì)胞無法在HAT培養(yǎng)基中增殖,HAT培養(yǎng)基可以篩選出骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞,其它細(xì)胞都會(huì)死亡據(jù)此推測,在單克隆抗體制備過程中缺失HPRT基因的細(xì)胞是 骨髓瘤細(xì)胞
骨髓瘤細(xì)胞
(“B淋巴細(xì)胞”或“骨髓瘤細(xì)胞”)。HAT培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是 既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體
既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體
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(3)在雜交瘤細(xì)胞篩選培養(yǎng)過程中,需在培養(yǎng)基中添加血清,并置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)箱中CO2的作用是 維持培養(yǎng)液的pH
維持培養(yǎng)液的pH
,篩選特定的雜交瘤細(xì)胞的過程利用的原理是 抗原抗體特異性結(jié)合
抗原抗體特異性結(jié)合
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(4)此過程獲得的抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞,可在體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖;若為體外培養(yǎng),則要定期更換培養(yǎng)液,目的是 動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
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