2020年的諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予Harvey J．Alter博士、Michael Houghton博士和 Charles M．Rice博士，以表彰他們對丙肝病毒的重要發(fā)現(xiàn)。丙肝病毒（HCV）是一種RNA病毒，人們將得到的HCV的多個抗原基因首尾相連，連接在同一調(diào)控組件下，可構(gòu)成HCV融合基因。經(jīng)基因工程產(chǎn)生出的HCV融合抗原可用于制作第三代HCV抗體檢測試劑?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得融合基因，即以相關(guān)的RNA為模板合成cDNA然后拼接起來，這個過程需要的酶有 逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶。其次要利用PCR技術(shù)擴增融合基因，即先根據(jù)融合基因的核苷酸序列，設計并合成引物，若該融合基因的序列為
（虛線處省略了部分核苷酸序列），則PCR設計應選用的兩種引物的部分序列應分別為：①5'—AACTAT—3'，②5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）。引物能與變性的融合基因單鏈結(jié)合，在 Taq酶Taq酶催化作用下延伸，如此循環(huán)多次。
（2）構(gòu)建表達載體，如圖所示，表達載體上除了標注的DNA片段外，在融合基因上游還必須擁有 啟動子啟動子，其作用是 是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
（3）用含 硫酸卡那霉素硫酸卡那霉素的培養(yǎng)基篩選出能生長的菌落。
（4）抗原蛋白是 HCV融合基因表達HCV融合基因表達的產(chǎn)物，將抗原蛋白注射到動物體內(nèi)，通過 體液體液免疫過程產(chǎn)生抗體，可制作出第三代HCV抗體檢測試劑。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶；5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）；Taq酶；啟動子；是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；硫酸卡那霉素；HCV融合基因表達；體液
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：2難度：0.6
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1．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?，?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植（克?。梢垣@得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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