人參是一種名貴藥材，具有良好的滋補(bǔ)作用．口服α-干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效．如圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程，①～④表示相關(guān)的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶，它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
| 限制酶 | 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) |
| EcoRⅠ |  |
| BamHⅠ |  |
干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
．科研人員還在兩種引物的一端分別加上了GAATTC
GAATTC
和GGATCC
GGATCC
序列，以便于后續(xù)的剪切和連接．（2）過(guò)程②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需結(jié)構(gòu)還有
復(fù)制原點(diǎn)
復(fù)制原點(diǎn)
，過(guò)程③中需先用Ca2+
Ca2+
處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞．（3）過(guò)程④中，科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后，先通過(guò)
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
過(guò)程獲得DNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增，若最終未能檢測(cè)出干擾素基因，其可能原因是干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細(xì)胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄
干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細(xì)胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄
．（4）治療中發(fā)現(xiàn)，用于口服的α-干擾素在胃中會(huì)受到一定程度的破壞影響其功效，需要利用
蛋白質(zhì)工程
蛋白質(zhì)工程
技術(shù)加以改造，以達(dá)到滿意效果．【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】干擾素基因兩端的部分核苷酸序列；GAATTC；GGATCC；復(fù)制原點(diǎn)；Ca2+；逆轉(zhuǎn)錄；干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細(xì)胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄；蛋白質(zhì)工程
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：1難度：0.3
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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