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為生產(chǎn)具有特定性能的α淀粉酶，研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α淀粉酶基因（1656個堿基對），利用基因工程大量制備α淀粉酶，實驗流程見圖。請回答下列問題：
（1）利用PCR技術(shù)擴增α淀粉酶基因前，需先獲得細(xì)菌的
基因組DNA
基因組DNA
。
（2）為了便于擴增的DNA片段與表達(dá)載體連接，需在引物的
5′
5′
端加上限制性酶切位點，且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點，主要目的是
使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連
使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連
。
（3）進(jìn)行擴增時，反應(yīng)的溫度和時間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定，下列選項中
②
②
的設(shè)定與引物有關(guān)，
⑥
⑥
的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。（填序號）
①變性溫度
②退火溫度
③延伸溫度
④變性時間
⑤退火時間
⑥延伸時間

【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．

【答案】基因組DNA；5′；使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連；②；⑥

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/7/9 8:0:8組卷：13引用：3難度：0.7

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1．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO₂的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于

（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用

將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的

技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是

。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入

個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為

?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是

。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是

。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代
發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6
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