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為使水稻獲得抗除草劑性狀,科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株,獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。
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注:GUS基因表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍(lán)色
(1)取某品種水稻的幼胚,先進(jìn)行
消毒
消毒
處理,然后接種到培養(yǎng)基中,水稻幼胚細(xì)胞生
脫分化
脫分化
形成愈傷組織。用含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌侵染該愈傷組織。
(2)用
CaCl2
CaCl2
處理農(nóng)桿菌后獲得
感受態(tài)
感受態(tài)
細(xì)胞,將與基因表達(dá)載體混合完成轉(zhuǎn)化后,在添加
潮霉素
潮霉素
的培養(yǎng)基中,經(jīng)篩選1得到含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。
(3)將草甘膦抗性基因作為
目的基因
目的基因
,與Ti質(zhì)粒用相同的
限制性核酸內(nèi)切酶
限制性核酸內(nèi)切酶
和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達(dá)載體。
(4)除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外,還可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進(jìn)行圖中的篩選2,以確定目的基因是否
表達(dá)
表達(dá)
。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細(xì)胞的
再分化
再分化
過程,獲得轉(zhuǎn)基因水稻。
(5)為獲得具有抗除草劑性狀的轉(zhuǎn)基因水稻,還需要在個(gè)體水平進(jìn)行抗性測試。請你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案,篩選出對草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻。
選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,用等量相同濃度的草甘磷農(nóng)藥噴灑,相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,觀測水稻的生長情況。選取可以正常生長的水稻,即為轉(zhuǎn)基因成功的水稻
選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,用等量相同濃度的草甘磷農(nóng)藥噴灑,相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,觀測水稻的生長情況。選取可以正常生長的水稻,即為轉(zhuǎn)基因成功的水稻
。

【答案】消毒;脫分化;CaCl2;感受態(tài);潮霉素;目的基因;限制性核酸內(nèi)切酶;表達(dá);再分化;選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,用等量相同濃度的草甘磷農(nóng)藥噴灑,相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,觀測水稻的生長情況。選取可以正常生長的水稻,即為轉(zhuǎn)基因成功的水稻
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中,進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達(dá)載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測,相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明
     
    。
    組別 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品
    將TI注射到大白
    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進(jìn)行混合檢測
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?;卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是
     

    (3)導(dǎo)入目的基因時(shí),首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上,挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細(xì)胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 3.我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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