鹽害是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的非生物脅迫因子之一,植物在高鹽脅迫下會產(chǎn)生大量H2O2和MDA(膜脂過氧化物)。LEA蛋白在植物遭受重大非生物脅迫時(如:鹽害)起到很大的保護作用,科研人員將耐鹽酵母LEA蛋白基因NLEAs導入大豆培育轉耐鹽基因大豆植株?;卮鹣铝袉栴}:
(1)為獲取NLEAS基因,可從酵母中提取總RNA,經(jīng)
逆轉錄
逆轉錄
過程得到cDNA,再經(jīng)PCR技術進行大量擴增。
(2)構建基因表達載體過程需要用到的有關酶是 限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
,若用同種酶切割載體后得到的一個末端序列為,則與該載體末端連接的NLEAS基因末端序列是 。構建的基因表達載體中具有終止子,終止子是指 位于基因尾端,使轉錄終止的特殊DNA片段
位于基因尾端,使轉錄終止的特殊DNA片段
。
(3)將NLEAs基因導入大豆細胞,常采用農(nóng)桿菌轉化法,農(nóng)桿菌的作用是 使目的基因進入受體細胞,并將目的基因整合到受體細胞染色體DNA上
使目的基因進入受體細胞,并將目的基因整合到受體細胞染色體DNA上
。
(4)科研人員從轉耐鹽NLEAs基因大豆根部提取到了大量LEA蛋白,但還是無法說明該基因工程操作是否成功,還需要從個體水平上設計實驗進行驗證,結合題干信息,寫出實驗思路,預期實驗結果 實驗思路:將長勢一致的野生型大豆和轉基因大豆幼苗種植在高鹽土壤中,一段時間后測定并比較兩種植株產(chǎn)生的H2O2和MDA含量
預期實驗結果:轉基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少
實驗思路:將長勢一致的野生型大豆和轉基因大豆幼苗種植在高鹽土壤中,一段時間后測定并比較兩種植株產(chǎn)生的H2O2和MDA含量
預期實驗結果:轉基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少
。【答案】逆轉錄;限制酶和DNA連接酶;
;位于基因尾端,使轉錄終止的特殊DNA片段;使目的基因進入受體細胞,并將目的基因整合到受體細胞染色體DNA上;實驗思路:將長勢一致的野生型大豆和轉基因大豆幼苗種植在高鹽土壤中,一段時間后測定并比較兩種植株產(chǎn)生的H
2O
2和MDA含量
預期實驗結果:轉基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H
2O
2和MDA含量更少