科研小組利用基因工程技術(shù)將“抗蟲基因”轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞成功培育出抗蟲棉，該技術(shù)所用的含“抗蟲基因”的DNA與質(zhì)粒上相關(guān)限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示（不同限制酶的識別序列和酶切位點：BamHⅠ5′-G^↓GATCC-3′，BclⅠ5′-T^↓GATCA-3′，Sau3AⅠ5′-^↓GATC-3′，HindⅢ5′-A^↓AGCTT-3′）。請分析并回答以下問題：

（1）將抗蟲基因轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞前，可以通過PCR擴(kuò)增獲得大量抗蟲基因，PCR擴(kuò)增前應(yīng)根據(jù)

目的基因兩側(cè)的脫氧核苷酸序列

目的基因兩側(cè)的脫氧核苷酸序列

設(shè)計引物。培育轉(zhuǎn)基因棉花的核心工作是

構(gòu)建基因表達(dá)載體

構(gòu)建基因表達(dá)載體

。由圖1和圖2分析可知，研究人員應(yīng)選擇

HindIII和Sat3AI

HindIII和Sat3AI

限制酶處理含抗蟲基因的DNA片段，在處理質(zhì)粒的時候應(yīng)選擇

HindII和BamHI

HindII和BamHI

限制酶。
（2）蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲基因，某研究團(tuán)隊將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨或共同轉(zhuǎn)化，獲得轉(zhuǎn)基因植株。
①將抗蟲基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)時，除了采用我國科學(xué)家獨創(chuàng)的花粉管通道法，還可以采用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

法，使用該方法時，應(yīng)將抗蟲基因插入到質(zhì)粒的

T-DNA

T-DNA

區(qū)域。
②標(biāo)記基因可用于檢測目的基因是否導(dǎo)入，由圖2可知，應(yīng)選含有

X抗生素

X抗生素

的培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞。為了檢測目的基因在受體細(xì)胞中是否穩(wěn)定表達(dá)，在分子水平上的檢測方法為

抗原抗體雜交

抗原抗體雜交

。
③圖3為將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨或共同轉(zhuǎn)化的實驗結(jié)果，據(jù)結(jié)果分析，

NaPI

NaPI

（選填“NaPI”或“StpinlA”或“NaPI+StpinlA”）轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳，得出該結(jié)論的原因是

飼喂NaPI轉(zhuǎn)基因的蟲體質(zhì)量較對照組差，且每株棉鈴蟲數(shù)較對照組少

飼喂NaPI轉(zhuǎn)基因的蟲體質(zhì)量較對照組差，且每株棉鈴蟲數(shù)較對照組少

。