將蘇云金芽孢桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉，其過(guò)程如圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）。

（1）過(guò)程①需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切，使二者的兩端形成

相同的黏性末端

相同的黏性末端

。為將過(guò)程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)，應(yīng)使用添加含

卡那霉素

卡那霉素

的培養(yǎng)基。
（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓

T-DNA

T-DNA

進(jìn)入棉花細(xì)胞。
（3）圖示為利用植物愈傷組織通過(guò)

器官發(fā)生

器官發(fā)生

途徑獲得試管苗的過(guò)程。過(guò)程④的培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素的濃度

大于

大于

（填“大于”、“等于”或“小于”）生長(zhǎng)素的濃度。過(guò)程⑤中應(yīng)將叢狀苗進(jìn)行

分株

分株

培養(yǎng)，再移入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得試管苗。
（4）培育轉(zhuǎn)基因棉的基本原理是讓Bt蛋白的基因在棉花細(xì)胞中

穩(wěn)定和高效的表達(dá)

穩(wěn)定和高效的表達(dá)

，為檢驗(yàn)其是否成功，常用的方法是

讓棉鈴蟲(chóng)攝入該葉片，觀察其存活情況

讓棉鈴蟲(chóng)攝入該葉片，觀察其存活情況

。